您好,欢迎访问仪器信息网
注册
艾本德中国/Eppendorf China

关注

已关注

白金20年 白金

已认证

粉丝量 0

科学仪器行业领军企业

400-831-5070

仪器信息网认证电话,请放心拨打

当前位置: Eppendorf > 解决方案 > 重组蛋白(磷酸酶)离心方案

重组蛋白(磷酸酶)离心方案

2023/06/12 15:39

阅读:100

分享:
应用领域:
医疗/卫生
发布时间:
2023/06/12
检测样品:
其他
检测项目:
重组人磷酸丝氨酸磷酸酶hPSP
浏览次数:
100
下载次数:
参考标准:
/

方案摘要:

重组蛋白质生产的目标是产生高产量的功能性蛋白质。实验成功的重要基础是细胞的培养以及离心(离心是蛋白质分离和纯化的基本技术)。 本应用指南描述了用作概念系统验证的重组人磷酸丝氨酸磷酸酶(hPSP)的生产流程。从Innova® S44i 摇床中细菌培养物的生长开始,使用装载6 L转子的高速离心机(CR30NX 或CR22N),搭配1.5 L 三角离心瓶收获这些培养物。该离心收获套装可辅以“ 锥底管高速沉淀离心套件”(转子含配套的50 mL 锥底管),用于裂解后续的分离操作。结果表明,这种产品组合高效灵活,可为重组蛋白大规模生产工作流程奠定基础。

产品配置单:

前处理设备

Eppendorf CR30NX大容量冷冻高速落地离心机(himac)

型号: CR30NX

产地: 日本

品牌: Eppendorf

¥50万 - 100万

参考报价

联系电话

Eppendorf CR22N大容量冷冻高速落地离心机(himac)

型号: CR22N

产地: 日本

品牌: Eppendorf

¥30万 - 50万

参考报价

联系电话

分析软件

Eppendorf Innova S44i 恒温摇床

型号: Innova

产地: 美国

品牌: Eppendorf

¥20万 - 50万

参考报价

联系电话

方案详情:

重组蛋白的生产是一项基本的生物技术,已应用于研究、医学和工业领域。这些蛋白质由转基因生物所产生。根据蛋白质的类型及其用途,可以使用许多不同的表达系统(例如细菌、酵母、哺乳动物细胞、昆虫细胞)。


如果需要对未知蛋白进行表征(即需要研究其结构和功能),那么需要目标产物的数量会更多。尤其是两个步骤会受此影响:必须扩大细胞培养和收获的规模(数升)。这对用于回收目标产物的仪器设备会提出更高的要求,同时也会导致更高的工作量(如果采用体量较小的设备)。


本应用指南阐述了通过培养和收获细菌以及纯化蛋白质来生产重组蛋白的工作流程。目的是证明使用Innova S44i 摇床和高速落地离心机CR30NX 可以获得高产的功能性重组蛋白。为此,我们使用了离心收获套装,并辅以高速沉淀离心套件。这种搭配可以帮助用户轻松且有效地执行工艺流程的每一个步骤。


image.png

表达系统:

用pET28a 质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),该质粒含有编码带His 标签蛋白的人磷酸丝氨酸磷酸酶(hPSP)基因


培养系统

使用Innova S44i 摇床(冷冻型,轨道直径2.5 cm)。该恒温摇床容量大,可以高速高效振荡大量培养物。因此,它非常适合以升为规模对培养物进行培养。


离心系统

高速落地离心机 CR30NX 可与独特的6 L 转子(R9A2 固定角转)组合使用,搭载独特的1.5L 三角瓶,搭配中等体积R19A2 固定角转以及50 mL 锥底管可完成高速离心收获。


image.png

下载本篇解决方案:

资料文件名:
资料大小
下载
使用InnovaS44i摇床和4x1.5L离心收获套装生产重组人磷酸丝氨酸磷酸酶.pdf
1186KB
相关方案

外泌体分离解决方案

外泌体(Exosome)是细胞分泌的一种细胞外囊泡(Evs),直径约为30-150 nm。其最初被认为是细胞的“垃圾”,但研究发现,外泌体可携带多种蛋白质、脂类、DNA和RNA等重要信息,在细胞间通讯与物质运输中发挥了重要作用。 越来越多的研究表明,外泌体在疾病诊断、组织损伤修复、肿瘤免疫治疗等领域大有用处。想要对外泌体的功能进行研究,获取高质量的外泌体至关重要。 在外泌体的分离纯化阶段,超速离心法一直是公认的外泌体分离“金标准”。Eppendorf拥有多款超速离心机,从台式/落地式微型超离到大容量落地款超离,满足多元化需求,助力外泌体纯化之旅。

生物产业

2024/05/10

使用CP-NX超速离心机和P40ST转子纯化膜筏

本文中,我们介绍了一种使用密度梯度超速离心法分离细胞 膜特殊区域⸺“ 脂筏”的方法。 脂筏不溶于表面活性剂,可以使用非离子型表面活性剂处理,并在蔗糖密度梯度溶液中进行离心,从而从细胞膜上去除。然后,可以在中密度和低密度介质液区域对其进行回收。超速离心法是对细胞膜微结构域内的目标分子进行定位的标准方法之一。

医疗/卫生

2023/06/12

利用密度梯度超速离心法从水稻中分离高尔基体

在本应用说明中,我们将采用一系列差速离心和非连续蔗糖密度梯度离心操作,使用Himac CP80-NX离心机(搭配P32ST 和P40ST 水平转子)从水稻幼苗中分离高尔基体。

农/林/牧/渔

2023/06/12

超速离心快速分离人血清中的脂蛋白

目前,从人血清中快速、高效地分离和表征脂蛋白已经成为冠状动脉疾病鉴别和研究的重要技术。密度梯度超速离心法(Density gradient ultracentrifugation)是分离不同脂蛋白组分的金标准。在本应用说明中,我们使用了CS150NX 微型超速离心机和S140AT 固定角转,其最大相对离心力为1,050,000 x g(140,000 rpm),最大样品容量为10 x 2 mL,能够高效地从人全血中分离脂蛋白。

医疗/卫生

2023/06/12

推荐产品
供应产品

艾本德中国/Eppendorf China

查看电话

沟通底价

提交后,商家将派代表为您专人服务

获取验证码

{{maxedution}}s后重新发送

获取多家报价,选型效率提升30%
提交留言
点击提交代表您同意 《用户服务协议》 《隐私政策》 且同意关注厂商展位