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贝克曼库尔特
2024/05/30 13:47
阅读:11
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01
技术背景
随着现代生物医学研究的不断深入,病毒载体作为一种强大的工具,在基因治疗和基因编辑等领域发挥着至关重要的作用。然而,病毒载体的纯化过程往往耗时且复杂,这在一定程度上限制了相关研究的进展。今天,我们就来探讨一种全新的方法——利用VTi 90垂直转子与CsCl(氯化铯)密度梯度离心技术,来加速病毒载体的纯化过程,提高实验效率。
02
方法介绍
研究团队通过使用VTi 90垂直转子和Optima XPN超速离心机,结合CsCl密度梯度离心技术,对病毒载体纯化过程进行了优化。通过多段离心,调整离心速度和离心时间,实现了在更短时间内达到密度梯度平衡的目标。
03
实验过程
在实验中,研究团队首先将病毒载体样品与CsCl溶液混合,然后将其加入Quick-Seal热封管中。再使用VTi 90转子进行离心,通过调整离心速度和离心时间,使样品在离心管内形成稳定的密度梯度。离心结束后,通过分馏的方式收集不同密度的样品组分,并使用折射仪测量各组分并绘制密度梯度曲线。通过比较不同实验步骤的密度梯度曲线,找到与旧步骤密度梯度曲线相同的实验条件,确保了样品条带位于相同位置。
离心结果示意图:
04
实验结果
基于 Optima XPN超速离心机对于分段离心步骤设置的支持(在一次运行中运行多个转速步骤),研究团队最终找到了一种能够在80分钟(50+30分钟)内达到密度梯度平衡的优化方案,较之前16小时的旧步骤提升了近12倍效率。
以更高的速度开始分离可以帮助更快地形成密度梯度。
将运行速度降低足够长的时间可以:
与现有的(较慢的)步骤获得相同的效果,将目标条带保留在完全相同的位置。
平坦化密度梯度曲线,可提供更高的条带分辨率。
05
结语
加速密度梯度形成、优化病毒载体纯化效率是一项具有重要意义的研究工作,不仅为病毒载体纯化领域带来了新的突破,也为广大科研工作者提供了更高效、更便捷的实验方法,从而降低了实验成本和时间成本,为相关领域的研究提供了有力支持!
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基础型号:Optima XE-100 / 90
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最大相对离心力(xg):802,000 / 694,000 / 548,300
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最大RPM:90 ,000
最大RCF:645,000 xg
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