使用液相色谱-串联质谱联用系统 (LC/MS/MS) 对动物组织和鸡蛋中的兽药进行多类别残留分析

    摘要

    本应用简报介绍了一种针对不同动物源性食品样品中多类别兽药的筛查和定量而开发的工作流程解决方案，内容涵盖从样品前处理到结果定量分析。这些兽药属于 32 个不同的化学类别，包括大环内酯类、磺胺类、四环素类、-内酰胺类、-激动剂类、氯霉素类、硝基咪唑类、头孢烯类、阿维菌素类、苯并咪唑类、糖皮质激素类、非甾体抗炎药 (NSAID) 类、肽类、抗球虫药类、喹诺酮类、咪唑类、雄激素类、聚醚类、三苯甲烷类、吩噻嗪类、喹喔啉类、抗吸虫药类、抗病毒药类、农药类、氨苯砜类、有机酸类、硝基类化合物、镇静剂类等。动物源性食品样品包括猪、牛和鸡的肌肉和肝脏以及鱼和鸡蛋。样品前处理包括利用酸化乙腈实现快速高效的蛋白质沉淀和目标物提取，然后使用 EMR-Lipid 增强型脂质去除净化管（部件号 5982-1010）和Polish 净化盐析萃取步骤相结合（部件号 5982-0102）进行进一步净化。该工作流程解决方案支持与安捷伦喷射流离子源结合使用的多种类型的安捷伦串联质谱仪（Agilent 6460 三重四极杆液质联用系统、Agilent 6470 三重四极杆液质联用系统和 Agilent 6495 三重四极杆液质联用系统）。

    前言

    兽药 (VD) 在兽医业中广泛应用于治疗和预防疾病，或用于提高生长和饲养效率。如果兽药施用不当，可能导致供人食用的动物源性食品中存在兽药残留，从而造成健康风险。在长期暴露下，尽管一些抗微生物剂在食品中的浓度非常低，也可能导致人群耐药性的提高。

    为更好地控制兽药的使用并保护公众健康，国家监管机构对肉类及其他食品中的兽药残留限量进行了监管。中国农业部 (MOA) 发布的第 235 号公告中将兽药分为四类：I 类药物允许使用，且没有规定最大残留限量(MRL)。II 类药物允许用于治疗疾病，需要遵守 MRL 规定。III 类药物允许用于治疗疾病，但是在人类食用的样品中不得检出。IV 类药物禁止使用，不允许在样品中检出。中国政府每年都会制定一系列用于控制 II、III 和 IV类兽药使用的监测计划。当前，中国发布的兽药残留分析标准方法重点针对仅一种化学类别或几种化学类别的药物（如磺胺类、喹诺酮类、四环素类等）。可能需要数天时间才可完成最终检测并得到报告。此类工作流程不仅耗时、费力且成本高，而且在处理大量样品时效率很低。我们的工作流程解决方案旨在使实验室能够同时分析多种化学类别的 180 多种经常监测的 VD。该方法中的兽药清单基于第 235 号公告（中国农业部）。

    动物源性食品样品包含大量蛋白质和脂类，为样品前处理带来了严峻挑战。在本研究中，选择酸化乙腈（5%甲酸）作为萃取溶剂，能够实现高效的蛋白质沉淀，将分析物萃取到有机相中。利用 Agilent Bond Elut EMR-Lipid增强型脂质去除净化管 (EMR-Lipid) 与 Polish 净化盐析萃取步骤相结合进行净化。EMR-Lipid 增强型脂质去除产品是一种新型吸附材料，能够选择性去除样品中的主要脂类且不影响分析物回收率。