细胞系与细胞株特性与应用:
细胞系:
细胞系可以连续传代培养,通常可以无限期地保持下去,具有无限繁殖能力。
细胞系在基础生物学研究、药物筛选、毒性测试等领域广泛应用,常用于探究细胞的生物学特性、疾病机制以及药物开发等方面。
著名的例子包括HeLa细胞系,它来自于1951年Henrietta Lacks的宫颈癌组织,被广泛用于医学研究,但也引发了一系列伦理和法律问题。
细胞株:
细胞株具有较高的同质性,细胞在传代培养的过程中能够保持较稳定的性状和功能。
细胞株常用于特定的实验或应用中,因为它们具有一些特定的生物学特性或标志,这些特性或标志在培养期间必须始终存在。
HEp-2人喉表皮样癌细胞
英文名称 | HEp-2 | 生长特性 | 贴壁细胞 |
货号 | P-X11106 | 种属 | 人 |
细胞形态 | 上皮细胞样 | 温度 | 液氮 |
冻存条件 | 冻存液:55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO | 培养基 | MEM(含NEAA)+10% FBS+1% P/S |
商品介绍:
细胞名称:HEp-2人喉表皮样癌细胞
生长特性 贴壁细胞
细胞形态 上皮细胞样
生长培养基 MEM(含NEAA)+10% FBS+1% P/S
冻存条件
冻存液:55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO
温度:液氮
培养条件
气相:空气,95%;CO2,5%
温度:37℃
推荐传代比例 1:3-1:4
推荐换液频率 2~3次/周
参考资料(来源文献)
背景描述 初认为,HEp-2细胞源自喉上皮癌,但随后通过同功酶分析、HeLa标记染色体和DNA指纹分析发现,HEp-2细胞的起源是HeLa细胞污染的。HEp-2细胞角蛋白免疫过氧化物酶染色阳性。(STR检测位点同HELA) 年龄(性别) 30岁 组织来源 起源HeLa细胞污染 细胞类型 肿瘤细胞 肿瘤类型 人乳头瘤病毒相关的宫颈内腺癌 生物安全等级 2 基因表达情况 keratin, The cells are positive for keratin by immunoperoxidase staining. 保藏机构 ATCC; CCL-23 BCRJ; 0101 CCLV; CCLV-RIE 0141 ECACC; 86030501
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细胞系培养步骤:
细胞系培养的步骤主要包括细胞复苏、细胞传代和细胞冻存。
细胞复苏:
将冻存细胞从液氮中取出后,在37℃水浴锅内不断摇动促进其融化。
将融化的细胞移入离心管中,加入37℃预热的DMEM完全培养基中(其中胎牛血清约为10%),轻轻吹匀,离心,500g离心2min,弃上清液。加入DMEM完全培养基清洗,弃上清液。加入DMEM完全培养基,轻轻吹打混匀,制成细胞悬液,接种于培养皿/瓶中,在含5% CO2的细胞培养箱中培养。
细胞传代:
当细胞密度达到80%~90%时,去掉完全培养基,用1X PBS清洗2次。
加入胰蛋白酶进行消化,放入细胞培养箱中约2-3min。
加入适量DMEM完全培养基终止胰蛋白酶消化,转移至离心管后500g离心2min,弃上清液,再加入DMEM完全培养基清洗,弃上清液。加入DMEM完全培养基,轻轻吹打混匀,吸取10微升进行计数,然后按照所需细胞量在含5% CO2的细胞培养箱继续培养。
细胞冻存:
当细胞密度达到80%~90%时,去掉完全培养基,用1X PBS清洗2次。
加入胰蛋白酶进行消化,放入细胞培养箱中约2-3min。
加入DMEM完全培养基终止胰蛋白酶消化,转移至离心管后500g离心2min,弃上清液,再加入DMEM完全培养基清洗,弃上清液。
这些步骤确保了细胞的生长和繁殖能够在体外环境中得到有效的维持和扩展,为科学研究提供了大量的细胞样本。
细胞系培养的步骤主要包括细胞复苏、细胞传代和细胞冻存。
细胞复苏:
将冻存细胞从液氮中取出后,在37℃水浴锅内不断摇动促进其融化。
将融化的细胞移入离心管中,加入37℃预热的DMEM完全培养基中(其中胎牛血清约为10%),轻轻吹匀,离心,500g离心2min,弃上清液。加入DMEM完全培养基清洗,弃上清液。加入DMEM完全培养基,轻轻吹打混匀,制成细胞悬液,接种于培养皿/瓶中,在含5% CO2的细胞培养箱中培养。
细胞传代:
当细胞密度达到80%~90%时,去掉完全培养基,用1X PBS清洗2次。
加入胰蛋白酶进行消化,放入细胞培养箱中约2-3min。
加入适量DMEM完全培养基终止胰蛋白酶消化,转移至离心管后500g离心2min,弃上清液,再加入DMEM完全培养基清洗,弃上清液。加入DMEM完全培养基,轻轻吹打混匀,吸取10微升进行计数,然后按照所需细胞量在含5% CO2的细胞培养箱继续培养。
细胞冻存:
当细胞密度达到80%~90%时,去掉完全培养基,用1X PBS清洗2次。
加入胰蛋白酶进行消化,放入细胞培养箱中约2-3min。
加入DMEM完全培养基终止胰蛋白酶消化,转移至离心管后500g离心2min,弃上清液,再加入DMEM完全培养基清洗,弃上清液。
这些步骤确保了细胞的生长和繁殖能够在体外环境中得到有效的维持和扩展,为科学研究提供了大量的细胞样本
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