T7 Endonuclease I

T7 Endonuclease I

商品属性：

 产品介绍：

描述：

T7 核酸内切酶 I 识别并切割不完全配对 DNA、十字型结构 DNA、Holliday 结构或交叉 DNA、异源双链 DNA 或者以更慢的速度切割含切刻的双链 DNA。该酶切割错配碱基 5′ 端的第一、第二或第三个磷酸二酯。
本产品是通过克隆重组表达 T7 核酸内切酶 I 基因，获得的高纯度蛋白，该酶无其他内切酶或外切酶污染。

活性定义：

在 50 μl 反应体系，37℃ 条件下，1 小时将90% 以上的 1 μg 超螺旋十字型结构的 pUC（AT）* 转化成 90% 以上的线性结构所需要的酶量定义为一个活性单位。
应用：
基因突变、SNP、TALEN 或 CRISPR/Cas9 形成的突变体检测识别错配 DNA分解四方向交叉 DNA 或分支 DNA检测或切割异源二聚体 DNA 和切刻 DNA随机切割线性 DNA 进行 shot-gun 克隆1X T7 Endonuclease I Buffer：
50 mM NaCl，10 mM Tris-HCl，10 mM MgCl2 ，1 mMDTT（pH 7.9 @ 25℃）
酶储存液：50 mM Tris-HCl, 50 mM KCl, 1 mM DTT, 0.1mM EDTA, 50% Glycerol, pH 7.5。
储存：置于-20°C 可保存 2 年，避免反复冻融。

注意事项：

(1) T7 核酸内切酶 I 是一种具有底物结构选择性的酶；该酶以不同的活性作用于不同的 DNA 底物。切割特定底物，必须控制酶量和反应时间。
(2)反应温度超过 42℃时，会增加非特异性核酸酶活性。 

pcr相关试剂实验结果分析：

PCR实验结果的分析涉及多个方面，‌包括实验操作、‌试剂质量、‌实验条件等，‌这些因素都会影响PCR实验的成功率和结果的准确性。‌以下是对PCR实验结果分析的一些关键点：‌

循环次数过多：‌增加模板量减少循环次数，‌缩短退火时间及延伸时间，‌或改用两种温度的PCR循环，‌可以有效避免循环次数过多导致的问题。‌

退火温度过低：‌退火温度的适当调整对于PCR反应的成功至关重要，‌过低的退火温度可能导致非特异性扩增，‌影响结果的准确性1。‌

电泳体系问题：‌包括凝胶中缓冲液和电泳缓冲液浓度相差太大、‌凝胶没有凝固好、‌琼脂糖质量差等问题，‌这些都会影响DNA片段的分离效果。‌

试剂盒问题：‌运输储存不当可能引起试剂盒失效，‌试剂盒本身质量问题如引物选择、‌循环参数设置不当也可能导致实验失败1。‌

降解的陈旧模板：‌使用降解的陈旧模板进行扩增容易产生涂布，‌影响结果的解读1。‌

PCR假阴性结果：‌可能由引物长度不够、‌试剂浓度不标准、‌靶序列突变或缺失、‌循环参数设置错误、‌标本中有Taq酶抑制剂、‌PCR产物检测系统灵敏度不够等因素引起。‌

为了获得准确的PCR实验结果，‌需要注意以下几点：‌

确保PCR反应体系中各种试剂的配比和操作步骤的精准度。‌

在PCR反应过程中需要对PCR产物进行实时监测，‌以便及时对反应条件进行调整。‌

防止样本的污染和交叉感染，‌以免影响PCR反应的准确性和可靠性。‌

通过上述分析，‌可以更好地理解和控制PCR实验中的关键因素，‌从而提高实验结果的准确性和可靠性。‌

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