单体亲和素磁珠

单体亲和素磁珠

商品属性：

 产品介绍：

亲和素（或链霉亲和素）和生物素之间表现的相互作用，是已知的非共价相互作用最高的一种。亲和素、链霉亲和素、 单体亲和素及其类似物已成为探针研究实验中强大的亲和配体工具，被广泛应用于生化分析、诊断、亲和纯化和药物递送。Monomer Avidin Magnetic Beads是一种高度均匀的超顺磁性微球，表面包裹着高密度的超纯（>97%）亚单位单体亲和素。单体亲和素源自天然四聚体蛋白，它保留了与天然亲和素相同的生物素结合特异性，但其生物素结合亲和力会有显著降低（kD=~10-8 M）。因此，通过使用温和的洗脱条件，例如含有2 mM 生物素的缓冲液，就可以很容易地从单体亲和素中洗脱结合的生物素化分子。本款磁珠经过专门设计、测试和质量控制，可用于免疫沉淀、细胞分选，以及从细胞裂 解液或杂交反应中快速一步捕获生物素化分子，如DNA、RNA、抗体或蛋白质。

操作方法：

操作过程中实验体积可根据需要放大或者缩小
提示：在纯化生物素化蛋白质、多肽和其他分子之前。用户应将试剂盒中的所有试剂温度 平衡至室温，并用双蒸馏水配制 1x 工作溶液。
1. 轻轻震动装有磁珠的试剂瓶，直到磁珠完全悬浮。将 50µl 磁珠转移到新试管中。
提示：客户应根据每个实验粗样品中生物素化分子的数量，根据经验确定最佳的磁珠
使用量。过多的磁珠会导致背景更高；磁珠使用量少会造成产量降低。我们建议纯化50μg 生物素化分子添加 50μl 完全悬浮的磁珠。
2. 将试管放在磁力分离器上1 分钟。当磁珠完全沉淀时，去除上清液。取下试管加入四倍 磁珠体积的d2H2O，充分混合。并将试管再次置于磁力分离器上1 分钟，完全去除上清 液。
3. 按照步骤2 所述方式，用四倍磁珠体积的1x PBS 缓冲液清洗磁珠。
4. 加入三倍磁珠体积的1xBlocking / Elution Buffer，通过涡旋充分混合，并在室温下培养5 分钟。将试管放在磁力分离器上1 分钟。完全去除上清液。
5. 加入六倍磁珠体积的1xRegenerationBuffer，通过涡漩充分混合，并将试管放在磁力分离 器上1 分钟。完全去除上清液。
6. 加入四倍磁珠体积的1x PBS Buffer，并按照步骤2 所述方式清洗磁珠。这些磁珠可以随时使用。
提示：必须立即使用磁珠，否则粘合能力将显著降低。
7. 向磁珠中加入含有生物素化分子的样品，通过移液器吹吸充分混合，并在室温下缓慢旋转培养30-60 分钟。
8. 将试管放在磁力分离器上，保持试管留在分离器上的同时去除上清液。如步骤 2 所示， 用1x PBS 清洗磁珠，直到在280 nm 处洗脱液的吸光度接近背景水平（OD280<0.05）。
9. 加入一倍磁珠体积的Blocking/Elution Buffer，通过移液器吹吸充分混合，并在室温下培养 5-10 分钟，将与磁珠结合的生物素化分子洗脱下来。

产品特点：

·快捷，简单的一步法高通量操作;无需纯化柱或过滤器，或重复移液、离心等操作
（图1）
·极高的结合能力，在温和的条件下洗脱结合的生物素化分子
·在温和的洗脱条件下纯化生物素化样品
·极小的非特异性结合
·对样本体积要求低，便于自动化操作
·成本低：只有市场同类产品磁珠价格的一半
·磁珠至少可以重复使用5次
缓冲液

·1x PBS Buffer (0.1 M 磷酸钠, 0.15 M 氯化钠; pH 7 ) ·1x Regeneration Buffer (0.1 M Glycine/HCl,pH 2.8) ·1x Blocking/Elution Buffer (2 mM D-生物素溶于 PBS)
磁力分离器（适用于手动操作）：根据实验时生物样品的体积，使用者可以选择以下不同型号的磁力分离器： 8 孔磁力架可以容纳 8 个单独的 1.5-2.0 ml 离心管 ; 24
孔磁力架可以容纳 24 个单独的 1.5-2.0 ml 离心管; 4 孔磁力-15 可以容纳 4 个单独的15ml 离心管; 4 孔磁力架-50 可以容纳四个单独的 50 ml 离心管。

pcr相关试剂实验结果分析：

PCR实验结果的分析涉及多个方面，‌包括实验操作、‌试剂质量、‌实验条件等，‌这些因素都会影响PCR实验的成功率和结果的准确性。‌以下是对PCR实验结果分析的一些关键点：‌

循环次数过多：‌增加模板量减少循环次数，‌缩短退火时间及延伸时间，‌或改用两种温度的PCR循环，‌可以有效避免循环次数过多导致的问题。‌

退火温度过低：‌退火温度的适当调整对于PCR反应的成功至关重要，‌过低的退火温度可能导致非特异性扩增，‌影响结果的准确性1。‌

电泳体系问题：‌包括凝胶中缓冲液和电泳缓冲液浓度相差太大、‌凝胶没有凝固好、‌琼脂糖质量差等问题，‌这些都会影响DNA片段的分离效果。‌

试剂盒问题：‌运输储存不当可能引起试剂盒失效，‌试剂盒本身质量问题如引物选择、‌循环参数设置不当也可能导致实验失败1。‌

降解的陈旧模板：‌使用降解的陈旧模板进行扩增容易产生涂布，‌影响结果的解读1。‌

PCR假阴性结果：‌可能由引物长度不够、‌试剂浓度不标准、‌靶序列突变或缺失、‌循环参数设置错误、‌标本中有Taq酶抑制剂、‌PCR产物检测系统灵敏度不够等因素引起。‌

为了获得准确的PCR实验结果，‌需要注意以下几点：‌

确保PCR反应体系中各种试剂的配比和操作步骤的精准度。‌

在PCR反应过程中需要对PCR产物进行实时监测，‌以便及时对反应条件进行调整。‌

防止样本的污染和交叉感染，‌以免影响PCR反应的准确性和可靠性。‌

通过上述分析，‌可以更好地理解和控制PCR实验中的关键因素，‌从而提高实验结果的准确性和可靠性。‌

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