TdT末端转移酶(Terminal Transferase)

TdT末端转移酶(Terminal Transferase)

商品属性：

 产品介绍：

描述：

末端转移酶（TdT）是一种不依赖于模板的 DNA 聚合酶，催化脱氧核苷酸结合到 DNA 分子的 3’羟基端。带有突出、凹陷或平滑末端的单双链 DNA 分子均可作为 TdT 的底物，加尾长度可达 5~300nt。本酶经电子重构架技术筛选，使其可以在 45°C 高温下反应，从而避免因 DNA 二级结构造成的加尾效率下降。该酶广泛用于 DNA 的 3’末端添加同聚物、利用修饰碱基（如 ddNTP，DIGdUTP）标记DNA 3’末端、TdT 介导的dUTP 缺口末端标记技术（细胞凋亡的原位检测）等试验。

活性定义：37 ℃ 60 分钟内，催化 1nmol dNTP 加入到多聚核苷酸 3’羟基末端中所需的酶量定义为 1 个活性单位
热失活：75°C 20min。
储存：-20℃ 可保存 3 年。

45°C 孵育 30min，本酶反应温度可在 37~45°C 之间调整，
45°C 条件下更利于末端暴露，从而利于加尾。
2. 75°C 20min 失活。

注意事项：

1、适量 EDTA 可使 Terminal Transferase 的活性丧失。
2、金属离子螯合剂，较高浓度的铵根离子、氯离子、碘例子和磷酸根离子均对 Terminal Transferase 活性具有抑制作用。
3、DNA 末端 mol 数的计算，长度为 100bp 的 DNA：1pmol末端 DNA=0.33ng。

pcr相关试剂实验结果分析：

PCR实验结果的分析涉及多个方面，‌包括实验操作、‌试剂质量、‌实验条件等，‌这些因素都会影响PCR实验的成功率和结果的准确性。‌以下是对PCR实验结果分析的一些关键点：‌

循环次数过多：‌增加模板量减少循环次数，‌缩短退火时间及延伸时间，‌或改用两种温度的PCR循环，‌可以有效避免循环次数过多导致的问题。‌

退火温度过低：‌退火温度的适当调整对于PCR反应的成功至关重要，‌过低的退火温度可能导致非特异性扩增，‌影响结果的准确性1。‌

电泳体系问题：‌包括凝胶中缓冲液和电泳缓冲液浓度相差太大、‌凝胶没有凝固好、‌琼脂糖质量差等问题，‌这些都会影响DNA片段的分离效果。‌

试剂盒问题：‌运输储存不当可能引起试剂盒失效，‌试剂盒本身质量问题如引物选择、‌循环参数设置不当也可能导致实验失败1。‌

降解的陈旧模板：‌使用降解的陈旧模板进行扩增容易产生涂布，‌影响结果的解读1。‌

PCR假阴性结果：‌可能由引物长度不够、‌试剂浓度不标准、‌靶序列突变或缺失、‌循环参数设置错误、‌标本中有Taq酶抑制剂、‌PCR产物检测系统灵敏度不够等因素引起。‌

为了获得准确的PCR实验结果，‌需要注意以下几点：‌

确保PCR反应体系中各种试剂的配比和操作步骤的精准度。‌

在PCR反应过程中需要对PCR产物进行实时监测，‌以便及时对反应条件进行调整。‌

防止样本的污染和交叉感染，‌以免影响PCR反应的准确性和可靠性。‌

通过上述分析，‌可以更好地理解和控制PCR实验中的关键因素，‌从而提高实验结果的准确性和可靠性。‌

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