NHS活化磁珠
商品属性:
货号 | 规格 | 产品名称 |
P-PR1061-1ml(30mg/ml) | 1ml(30mg/ml) | NHS活化磁珠 |
产品介绍:
产品介绍: NHS-Activated Magnetic Beads 是均匀的,表面覆盖有高密度NHS(N-羟基琥珀 酰亚胺) 官能团的磁珠。磁珠通过形成稳定的酰胺键方式,快速、高效的共价结合任何含有伯胺的配 体(图 1)。本款磁珠可以在偶联条件下快速完成反应(室温 pH 6.5-9 下 15-30 分 钟,4℃ 下 4 小时),且不需要危险化学品。 NHS-activated Magnetic Beads 最适于结合大分子蛋白。 Long-arm NHS-activated Magnetic Beads 被推荐用于结合小肽分子, 因为其长臂(21-原子) 的亲水连接基团可以减少位阻现象。 NHS-activated Magnetic Beads 可以完美地作为亲和树脂进行亲和纯化,将分子、 细胞和 部分细胞提取物进行提炼纯化。在与配体结合后,将磁珠添加到含有目标分子的样品中,然 后混合、孵育、洗涤和洗脱目标分子(图2)。
操作方法:
提示:
强烈建议在实验过程中进行滴定优化,以确定每个实验中应用的磁珠数量。该协议可以相应地放大和缩小。避免使用含有 tris 或其他含有伯胺类试剂的缓冲液,因为它们与预期的偶联反应竞争。
1.将适量的珠子转移到离心管中。将管放在磁力分离器上 1-3 分钟。当磁珠完全沉淀时, 去除上清液。
2.取下试管,加入 5 倍磁珠溶液体积的 PBS 缓冲液,通过震荡重新悬浮磁珠,涡旋 30 秒。将试管至于室温环境 1-3 分钟,再将管放在磁力分离器上 1-3 分钟。当磁珠完全沉淀 时,去除上清液。
3.重复步骤 2 两次。
4.向含有目标蛋白质的粗样品中添加洗涤过的磁珠,并在室温或所需温度下温浴 1-2 小时 (温度越低,培养时间越长)。提示:强烈建议进行滴定实验以优化培养时间。因为孵化 的时间太长可能会导致很高的背景。
5.用 5 倍磁珠体积的 PBS 缓冲液或 1M NaCl 彻底清洗磁珠,直到 280nm 处洗脱液的吸 光度接近背景水平(OD 280<0.05)。提示:添加更高浓度的盐、非离子洗涤剂和还原剂也 可能会降低非特异性背景。例如,向洗涤缓冲液中添加 NaCl(浓度为 1-1.5 M)、0.1-0.5% 的非离子洗涤剂,如 TritonX-100 或 Tween-20,以及还原剂,如 DTT 或 TCEP(我们通 常使用 3mM)。 6.通过适当的方法,如低 pH(2-4)、高 pH(10-12)、高盐、高温、亲和洗脱或 SDS-PAGE 上样缓冲液中煮沸,洗脱目标蛋白。
产品特点及优势:
·预活化即用型磁珠
·便于使用
·在pH7.4,4℃-25℃条件下可以快速偶联
·稳定的共价键,低水平的配体泄漏
·可重复使用的免疫亲和基质
·极低的非特异性结合率
·用途:用于纯化抗体,蛋白质/肽,DNA / RNA;细胞筛选、免疫沉淀
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![7.png](https://img1.17img.cn/17img/images/202408/uepic/1321522b-6687-4131-a7b4-7a74974aa01c.jpg)
pcr相关试剂实验结果分析:
PCR实验结果的分析涉及多个方面,包括实验操作、试剂质量、实验条件等,这些因素都会影响PCR实验的成功率和结果的准确性。以下是对PCR实验结果分析的一些关键点:
循环次数过多:增加模板量减少循环次数,缩短退火时间及延伸时间,或改用两种温度的PCR循环,可以有效避免循环次数过多导致的问题。
退火温度过低:退火温度的适当调整对于PCR反应的成功至关重要,过低的退火温度可能导致非特异性扩增,影响结果的准确性1。
电泳体系问题:包括凝胶中缓冲液和电泳缓冲液浓度相差太大、凝胶没有凝固好、琼脂糖质量差等问题,这些都会影响DNA片段的分离效果。
试剂盒问题:运输储存不当可能引起试剂盒失效,试剂盒本身质量问题如引物选择、循环参数设置不当也可能导致实验失败1。
降解的陈旧模板:使用降解的陈旧模板进行扩增容易产生涂布,影响结果的解读1。
PCR假阴性结果:可能由引物长度不够、试剂浓度不标准、靶序列突变或缺失、循环参数设置错误、标本中有Taq酶抑制剂、PCR产物检测系统灵敏度不够等因素引起。
为了获得准确的PCR实验结果,需要注意以下几点:
确保PCR反应体系中各种试剂的配比和操作步骤的精准度。
在PCR反应过程中需要对PCR产物进行实时监测,以便及时对反应条件进行调整。
防止样本的污染和交叉感染,以免影响PCR反应的准确性和可靠性。
通过上述分析,可以更好地理解和控制PCR实验中的关键因素,从而提高实验结果的准确性和可靠性。
公司正在出售的产品:
小鼠酪氨酸羟化酶(TH)elisa检测试剂盒 | 微管蛋白γ/Tubulin γ抗体 Anti-gamma tubulin (Centrosome Marker ) |
大鼠泛素连接酶(E3/UBPL)elisa检测试剂盒 | 肝再生磷酸酯酶2抗体 Anti-PRL2/PTP4A2 |
犬干扰素诱导蛋白10(IP-10/CXCL10)elisa分析检测试剂盒 | 磷酸酯酶3蛋白抗体 Anti-PRL3/PRL-R |
血液乙醛脱氢酶3活性比色法定量检测试剂盒 | 单纯疱疹病毒HSV1 GE包膜蛋白抗体 |
糖果柠檬酸比色法定量检测试剂盒 | HSV1 gE Envelope Protein |
小鼠DNA甲基转移酶3B(DNMT3B)elisa检测试剂盒 | 丝氨酸/精氨酸相关核基质蛋白1抗体 Anti-SRRM1 |
视神经病变诱导蛋白抗体 Optineurin | OR6B1 |
瞬时受体电位离子通道蛋白7抗体(M亚家族) TRPM7 | 嗅觉受体6B1抗体 |
锌指蛋白503抗体 Anti-ZNF503/NOLZ1 | Rat N-Methyl-D-Aspartate (NMDA) Receptor 2 (NR2) ELISA Kit |
螺旋环螺旋蛋白1+2抗体 Anti-NHLH1 + NHLH2 | 磷酸化丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶p38γ抗体 Anti-phospho-SAPK3 (Thr183+Tyr185) |
环指蛋白70抗体 Anti-RNF70 | 大鼠N-甲基-D-天门冬氨酸(NMDA)受体亚单位NR2 elisa分析检测试剂盒 |
组蛋白H2A/S抗体 HIST1H2AH | 10号染色体开放阅读框88抗体 C10orf88 |
人骨钙素/骨谷氨酸蛋白(OT/BGP)elisa分析检测试剂盒 | 磷酸化致癌基因C-Myc抗体 phospho-C-Myc (Ser62) |
OT/BGPELISAkit | DNA修复酶Ku-80重组兔单克隆抗体 Ku80 |
磷酸化系统性红斑狼疮先关蛋白TREX1抗体 phospho-ATRIP (Ser68+Ser72) | NHS活化磁珠肌钯蛋白抗体 MYPN |
eIF3s8蛋白抗体 eIF3s8 | 环指蛋白40抗体 RNF40 |
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