Bst 3.0 DNA/RNA polymerase
商品属性:
货号 | 规格 | 产品名称 |
P-PR1119-1600U | 1600U | Bst 3.0 DNA/RNA polymerase |
产品介绍:
Bst 3.0 DNA/RNA聚合酶是嗜热脂肪芽孢杆菌(Bacillus stearothermophilus)DNA聚合酶I大片段(Bst LF)经过基因突变改造过的聚合酶。该酶具有5’-3’的DNA聚合酶活性和链置换活性,无5’-3’核酸外切酶活性。与Bst 2.0 DNA聚合酶相比,Bst 3.0 DNA聚合酶的热稳定性、扩增速度、链置换速度和逆转录活性有了进一步的提升。适合高温快速LAMP类型的等温扩增实验。
活性单位: 一个活力单位(1 U)即在 65°C 条件下,30 分钟内催化 25 nmol dNTP 的掺入反应成为酸不溶性物质所需的酶量。
质量控制:
SDS-PAGE 检测纯度大于99%,经检测无核酸外切酶,内切酶活性,无细菌基因组DNA残留。通过各种模板进行等温扩增测试。室温存放一周,无明显活性改变。
应用范围:
1.DNA或RNA为模板的LAMP等温扩增。
2.适用于链置换方法扩增DNA。
3.高GC结构DNA的测序和微量DNA模板快速测序。
10×Bst Buffer:200 mM Tris-HCl,100 mM (NH4)2SO4,500 mM KCl,80mM MgSO4,1% Tween? 20
pH 8.8@ 25°C
储存缓冲液:10 mM Tris-HCl,50 mM KCl,1 mM DTT,0.1 mM EDTA,50% Glycerol,0.1% Triton? X-100,pH 7.5 @ 25°C
pcr相关试剂实验结果分析:
PCR实验结果的分析涉及多个方面,包括实验操作、试剂质量、实验条件等,这些因素都会影响PCR实验的成功率和结果的准确性。以下是对PCR实验结果分析的一些关键点:
循环次数过多:增加模板量减少循环次数,缩短退火时间及延伸时间,或改用两种温度的PCR循环,可以有效避免循环次数过多导致的问题。
退火温度过低:退火温度的适当调整对于PCR反应的成功至关重要,过低的退火温度可能导致非特异性扩增,影响结果的准确性1。
电泳体系问题:包括凝胶中缓冲液和电泳缓冲液浓度相差太大、凝胶没有凝固好、琼脂糖质量差等问题,这些都会影响DNA片段的分离效果。
试剂盒问题:运输储存不当可能引起试剂盒失效,试剂盒本身质量问题如引物选择、循环参数设置不当也可能导致实验失败1。
降解的陈旧模板:使用降解的陈旧模板进行扩增容易产生涂布,影响结果的解读1。
PCR假阴性结果:可能由引物长度不够、试剂浓度不标准、靶序列突变或缺失、循环参数设置错误、标本中有Taq酶抑制剂、PCR产物检测系统灵敏度不够等因素引起。
为了获得准确的PCR实验结果,需要注意以下几点:
确保PCR反应体系中各种试剂的配比和操作步骤的精准度。
在PCR反应过程中需要对PCR产物进行实时监测,以便及时对反应条件进行调整。
防止样本的污染和交叉感染,以免影响PCR反应的准确性和可靠性。
通过上述分析,可以更好地理解和控制PCR实验中的关键因素,从而提高实验结果的准确性和可靠性。
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