离体猪皮肤完整性随IVPT试验时间的动态变化探究

合邦科仪

2024/07/15 10:15

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透皮扩散试验（IVPT）作为评价经皮给药制剂效能的重要试验之一，通过模拟真实环境，利用离体皮肤模型（典型是猪皮），动态监测给药后特定时间内透过皮肤的药物累积渗透量和渗透速率，从而考察药物及其制剂与参比药物的一致性，为评价制剂的安全性和有效性提供参考和保证。

确保离体皮肤各层次，尤其是角质层的完整无损，是获取准确、可靠IVPT数据的前提与基石。遵循USP＜1724＞半固体药品性能试验的严格标准，在上样前对生物膜的完整性进行确认是不可或缺的一环；OECD发布的皮肤吸收研究指导文件亦强调了在试验前后对皮肤完整性的细致确认；而《经皮给药制剂体外经皮渗透试验技术规范专家共识探讨》更明确指出，对离体皮肤屏障功能，即皮肤完整性的双重检测（试验前后），是确保实验结果有效性的关键步骤。

经皮水分流失测量仪——皮肤完整性检测仪器

通过测量TEWL值来反映皮肤屏障的完整性；用于体外透皮试验(IVPT)中离体皮肤的完整性评价(SIFT)；
可单独使用或与电脑连接一起使用；
便携，无电线，可轻松测量。

2022年10月FDA发布的中表示，在使用皮肤进行IVPT实验前后需要测量皮肤的完整性，且经皮水分流失测定法是推荐方法之一。

皮肤电阻率仪——皮肤完整性检测仪器

离体皮肤电阻测试仪用于体外透皮试验(IVPT)中离体皮肤的屏障完整性评价(SIFT)，通过测量电阻进行离体皮肤的评估筛选，控制皮肤的质量，降低体外透皮试验的相对标准偏差。

2022年10月FDA发布的中表示，在使用皮肤进行IVPT实验前后需要测量皮肤的完整性，且皮肤电阻率测定法是推荐方法之一。

鉴于目标化合物的特异性，IVPT试验时长与取样时间点需量身定制，以充分反映药物特性及制剂配方的影响。《经皮给药制剂体外经皮渗透试验技术规范专家共识探讨》中还提到，基于皮肤细胞的活性考量，通常建议将IVPT时长控制在24小时以内，以维护皮肤屏障功能的稳定与完整；若研究需求超越此时限，则需采取特别措施，确保在整个试验周期内，皮肤屏障的完整性与功能得以有效维持。

为进一步探究实验过程中皮肤完整性的动态变化，我们设计了一套验证性实验方案，旨在通过系统性监测，直观展现随着时间推移皮肤屏障状态的变化趋势，为IVPT试验的精准执行与结果解读提供强有力的支持。

实验详情如下：

实验目的

探究离体猪皮肤在实验环境下皮肤完整性随时间的变化。

实验前准备

仪器：透皮扩散仪（HB合邦科仪）

经皮失水仪（瑞士SKT）

皮肤电阻率仪（瑞士SKT）

介质：生理盐水，庆大霉素

样品：巴马香猪皮肤6片（来自不同供体）

实验方法

1. 配制介质溶液，在0.9%氯化钠溶液中加入0.02%的硫酸庆大霉素，配置300ml介质溶液；

2. 取自不同供体的巴马香猪皮肤6片，安装在透皮扩散池上，将组装好的透皮扩散池安装到透皮扩散仪上；

3. 透皮扩散仪方法设定：温度32℃，转速600rpm；

4. 分别在0 h、2 h、4 h、6h、8 h、24 h，测量并记录6组皮肤的经皮失水值和皮肤电阻数据。

测试结果

图1. 猪皮肤24h经皮失水变化趋势图

6组皮肤的0-24h经皮失水数据变化趋势如上图所示，由图可知，在实验过程中，各组皮肤的经皮失水值（TEWL）呈现一定幅度的上下浮动，但这种波动始终维持在一个相对稳定的范围内，即总体波动区间限制在1.0至3.0g/m²/hr之间，且所有记录的最高值均未超过15g/m²/hr的阈值，验证结果表明在24小时内IVPT实验中皮肤经皮水分流失数值始终保持在合格且相对稳定的范围内。