内毒素在细胞内的解毒和清除中的内化阐述

内化：受体内化是受体进行信号转导和物质摄取的重要方式。也涉及受体数目减少和调节机体应答等方面。利用配体标记技术进行的实验表明，许多多肽等信号分子进入靶细胞可能需要借助于细胞表面的受体介导的内吞作用。内化是一种特殊的胞吞作用，细胞对营养物质的摄取和对外来物质的内吞需要内化才能够完成其生物学功能。内化可通过两种方式进行：①需要网格蛋白（clathrin）或包被蛋白的参与，如图20-1所示。②无网格蛋白和包被蛋白的参与，需借助细胞膜的内陷发生内化。

由网格蛋白参与的内化过程为：受体与相应的配体结合后，原先呈弥散分布的受体几分钟内就以受体配体复合物的形式成簇（clustering），聚集在细胞凹陷处，网格蛋白聚集到凹陷的胞质面上，形成包被小窝（coated pit）；在多种胞内成分Ⅰ型包被蛋白复合物（coat protein complexⅠ，COPⅠ）和COPⅡ参与下，包被小窝逐渐内陷，形成早期内体（early endosome），晚期内体（late endosome），随后与溶酶体融合，释放其配体，受体既可以在溶酶体中彻底分解，也可参与其自身的再循环（recycling）；在溶酶体内的配体可被分拣到高尔基复合体，使其在高尔基体被修饰。其中受体再循环的意义有人认为与配体调节功能有关，认为受体再循环有利于物质的转运，如LDL对血脂的运输作用；但也有人认为与配体功能无关，如胰岛素的抗体片段（Fab）也可引起胰岛素受体内化。

非网格蛋白参与的内化，借助于一种称为caveolae 的小窝结构，其聚集了多种糖基肌醇磷脂（GPI）锚定蛋白，需许多受体介导，如 CD14、CD55、CD59、CD48等，一旦与配体结合后，随即就关闭掉其细胞膜外侧，形成与质膜相连的小泡，其中浓缩了多种信号分子进行跨膜转运，这一过程也称为胞饮作用（pitocytosis）。小泡内陷也形成内体，随后结合到溶酶体或高尔基体，再进一步分拣。

内化过程中所形成的内体的去向也存在差异，有的与溶酶体融合，有的内化到高尔基复合体上。配体和受体内化到相应目的地后也会出现不同的结局，有些受体会返回到细胞膜参与再循环；有的受体和内化物质会在细胞器中被降解或被修饰，失去原来的生物学功能，如到达溶酶体后被溶酶体内酸性环境中的酶水解，或到达高尔基体发生磷酸化或去磷酸化、酰基化﹑糖基化、羟基化等修饰反应，使内吞物质的生物学活性发生改变，或再分拣到其他细胞器，如到溶酶体发生酶解。

内毒素进入机体后，与血浆中有关的蛋白质如LBP和HDL等血浆脂蛋白结合，LBP和LPS形成LPS-LBP复合物，进而将LPS转运到中性粒细胞和巨噬细胞上的多种受体上，如与mCD14，CD11/CD18、清道夫受体、选择素样受体、衰变加速因子（CD55）等受体结合，甚至可以直接结合到TLR4 上，随后LBP与LPS发生分离。LPS通过这些受体发生内化活动，进入细胞膜内，如mCD14与单体LPS发生分离后，单体LPS内化到高尔基体内，并可能引发激活效应，而LPS的聚集体和mCD14则同时进入溶酶体。中性粒细胞、单核-巨噬细胞以及树突状细胞的溶酶体内存在酰基羧基水解酶（acyloxyacyl hydrolase，AOAH），能够将LPS中的3-羟基十四烷酸酰化基团水解，形成脱酰基脂质A（deacylationlipidA）。

由于职业性吞噬细胞（中性粒细胞、巨噬细胞）吞噬能力强，易于观察；而且其溶酶体丰富，与解毒效应的关系极其密切，故实验多以巨噬细胞株为研究对象。在单核-巨噬细胞和中性粒细胞中，LPS中的脂质A可以在溶酶体发生脱酰基化deacylation，在脱酰基化的基础上还可以发生去磷酸化反应，使LPS形成单磷酸脂质A ⅣA（4' -monophosphoryllipid A ⅣA），后者的毒性较前者显著降低，表现出机体的解毒机制。