内毒素检测时，血液前处理方法的注意点有哪些？

1、在进行血中内毒素测定时，要注意选择方法和试剂。

2、血浆或血清制备

作为临床上常用样本主要为血浆，其使用率占95%以上，因此作为体液主要部分血浆的制备就显得十分重要。据Das报道：内毒素一般除了游离状态外，还大量附着在血小板上，因此用含有大量血小板的血浆作为样品更为合适。在制备人血浆或动物血浆时，目前国外为了防止细胞的破坏多采用低温分离，使用含有大量血小板的血浆样品，即在4℃1000gx10分钟分离条件，或在无低温离心机时用3000gx40秒分离条件。切不可在常温下进行高速、长时间分离，另外，在分离血浆或血清时，要避免细菌的污染。

血清的制备：用不加抗凝剂的注射器采血转入离心管中，在冰水浴中放置30分钟，4℃条件下、1000xg、10分钟进行离心分离血清。

血浆或血清分离后，若暂时不用，可在-80℃冰冻保存，并在1个月以内使用。注意为了避免吸附内毒素，请使用玻璃制试管保存。

3、抗凝剂种类及影响

在制备血浆时由于加入一定的抗凝剂，因此抗凝剂的种类和加入量对于回收率都有很大的影响，一般常用抗凝剂主要有：肝素，枸橼酸钠及EDTA等，其中以肝素的使用最多。然而，我们知道大量的肝素会对内毒素反应有干扰作用，尤其对稀释加热法和氯仿提取法将使回收率下降，而对PCA法影响较少，因此在制备血浆时肝素的加放量只需2~5μl/ml即可。