鲎血淋巴中的免疫应答因子之凝固因子的介绍

鲎先天性免疫系统完全依赖于一套独特且非常有效的宿主防御系统和凝血系统。目前人们已从鲎血淋巴的血细胞和血浆中分离纯化了多种参与鲎凝血反应和宿主防御的免疫应答因子。今天主要讲解是的凝固因子。

一、凝固因子（coagulation factors）

鲎血淋巴进行快速凝血对宿主防御和止血均非常重要^[1,2]。该凝血级联反应由4种凝固因子和1种凝固蛋白原（cogaulogen）组成。其中凝固因子包括C因子、G因子、B因子及前凝固酶（proclotting enzyme），这些因子都属于丝氨酸蛋白酶原家族。

1.C因子

C因子为糖蛋白，是鲎凝血反应中由细菌内毒素（LPS）激活的凝血级联反应的起始点。分子质量为123 ku，由轻、重二链通过二硫键组成，其重链N端可以与LPS特异结合，而轻链C端有催化活性。在 LPS作用下C因子被活化，活化的c因子有酰氨化酶活性，可激活B因子。B因子进一步将前凝固酶活化为凝固酶。这一丝氨酸蛋白酶的级联活化最后使凝固蛋白原转化为凝固蛋白凝胶。

基于该原理利用鲎血细胞崩解物制成的鲎试剂，已被广泛应用于LPS检测。这种细菌内毒素检测方法即“鲎试验法”，自1968年提出后，已被陆续纳入各国药典^[3]。

2.B因子

B因子是C因子的靶因子，分子质量约64 ku，在活化的C因子的激活下﹐B因子可将前凝固酶活化为凝固酶。

3.G因子

G因子是鲎凝血反应的另一起始点，是一种特殊的丝氨酸蛋白酶原，为异二聚体，可被真菌细胞壁组分（1→3）-β- D-葡聚糖特异性激活^[4]。

4.前凝固酶

前凝固酶分子质量约38 ku，由346个氨基酸组成。可被活化的B因子或C因子激活为凝固酶，凝固酶可进一步活化凝固蛋白原，形成不可溶的凝固蛋白凝胶。

5.凝固蛋白原（coagulogens）

目前已从美洲鲎、中国鲎及2种东南亚鲎体内获得4种凝固蛋白原。凝固蛋白原是鲎凝血系统的核心，是凝血级联反应的的靶蛋白，与脊椎动物的纤维蛋白原功能相似，但不同的是凝固蛋白原是在血细胞的大颗粒内而不存在于血浆中。凝固蛋白原是碱性多肽链，由3个片段（A、B、C）组成。在凝胶化过程中，C肽被释放出来，最终形成的凝固蛋白凝胶分子由A、B二条链以二硫键连接而成。

参考文献：

1.Muta T, Iwanaga S . The role of hemolymph coagulation in innate immunity[J].Curr Opin Immuno, 1996, 8:41-47.

2.Muta T, Iwanaga S. Clotting and immune defense in Limulidae[J] . Prog Mol Subcell Biol, 1996, 15:154-189.

3.Ding J L, Ho B. A new era in pyrogen testing[J] . Trends Biotech, 2001, 19(8):277-281.

4.Takaki Y, Seki N, Kawabata S S, et al . Duplicated binding sites for ( 1→3)-beta-D-glucan in the hor-seshoe crab coagulation factor G implications for a molecular basis of the pattern recognition in innate immunity[J] . J Biol Chem, 2002, 277(16):14 281-14 287.