干细胞大规模培养制备整体解决方案

干细胞（Stem cells）是指一类具有高度自我更新与分化潜能的细胞群体，在特定诱导条件下，可分化成为各类功能细胞群，形成相应的组织或器官。干细胞可颠覆常规治疗手段，在治疗多种重大疾病方面有着极大潜能。利用干细胞移植，已经能够治疗多种常规医疗手段无法解决的重大疾病。

近年来，干细胞产业化发展迅猛，受关注程度日益增加。目前国际上有超过13种干细胞产品上市，主要用于心血管疾病、自身免疫病、骨关节炎、复杂性肛瘘和移植物抗宿主病等疾病治疗。而我国尚无1种干细胞产品获批上市，因此，大力推进干细胞产业化，以满足临床转化和应用需求，对于抢抓新一轮生物医药领域产业变革和历史发展机遇，改变干细胞产业“跟跑”和被动局面，具有重大现实意义。

但如何提高干细胞数量及质量，满足干细胞治疗产品临床应用的实际需求，是干细胞产业化所面临的巨大挑战。使用微载体结合生物反应器进行干细胞三维扩增培养，是一种理想的解决方案。

2、 行业局限

二维培养：

• 人工成本高

• 传统胰酶消化损伤细胞

• 难以实现规模化、自动化

• 单批次收获108

• 批次间差异大

对干细胞产业需求而言，细胞培养“质”不达标、“量”不充足。

3、 华龛突破

干细胞大规模培养制备整体解决方案

华龛生物基于3D微载体，开发出的3D FloTrix® 贴壁细胞培养工艺，涉及接种、培养、扩增、收获、清洗、分装多个环节，实现了细胞药物、细胞衍生品、病毒以及蛋白的全封闭式规模化、智能化的生产制备。

• 贴壁细胞的悬浮式培养

3D TableTrix® 微载体为细胞提供贴壁位点，通过持续搅动使微载体保持均匀的悬浮状态，从而实现贴壁细胞的悬浮式培养

• 核心技术自主攻坚研发

核心产品3D FloTrix® 细胞扩增套装及3D FloTrix®生物反应器均为自主研发并获得国家专利认证

• 显著提升产物制备效率

较传统人工2D细胞培养可大幅降低生产成本

4、 应用案例：

(1) 人源脐带MSC

• 人源脐带MSC细胞扩增曲线

多次实验表明，采用3D TableTrix® 微载体结合3D FloTrix® 动态培养工艺，脐带MSC的96h扩增倍率可达10-16倍。

• 人源脐带MSC连续传代

采用3D TableTrix® 微载体结合3D FloTrix® 动态培养工艺，将脐带MSC连续传代6次，96h扩增倍率仍可保持12-14倍。

• 脐带MSC连续放大扩增曲线

采用3D TableTrix® 微载体结合3D FloTrix® 动态培养工艺，可实现脐带来源MSC的多级反应器连续放大培养，单个罐体单批次可生产【百亿量级】干细胞。

(2) 牙髓来源MSC(DPSC)

• 牙髓来源MSC(DPSC)连续扩增曲线

采用3D TableTrix® 微载体结合3D FloTrix® 动态培养工艺，牙髓来源MSC（DPSC）经一次3D放大传代后，144h扩增倍率可达180-200倍以上。

(3) ESC分化MSC

• ESC分化MSC扩增曲线

采用3D TableTrix® 微载体结合3D FloTrix® 动态培养工艺，ESC分化MSC的144h扩增倍率可约达40-50倍。

5、 质检数据

(1) 细胞流式分析

经3D微载体培养扩增所收获的MSC各项表面标记物指标均合格

(2) 三向分化

经3D微载体培养扩增的MSC具备成骨、成脂、成软骨的三系分化能力

(3) 细胞安全性检测

经3D微载体培养扩增所收获的MSC，无内毒素、支原体、外源病毒引入

(4) 微载体降解残留