荧光显微镜荧光光源可发出各种波长的光,激发块利用激发滤光片来选择保留哪些波长,通过落射照明激发荧光标记的荧光效果,再用发射滤光片会把发射光以外的激发光、杂散光都过滤掉,从而让用户更清晰地观察目标荧光标记。
荧光染料(也称为荧光团/活性染料)可以简单地描述为分子(本质上是非蛋白质),在显微镜下,通过吸收给定波长的光并以更长的波长重新发射光来实现其功能。这种荧光产生不同的颜色,可以可视化和分析。荧光染料通常用于各种生物分子(抗体、肽、各种蛋白质等)的荧光标记,用于监测药物向目标组织的输送、成像等过程。
根据应用荧光染料范围来选择荧光激发模块,有以下几种:
一、
·FITC:荧光抗体
·吖啶组织结构:DNA,RNA
·金胺染料:瘤状芽孢杆菌
·EGFP,S567,RSGFP
激发方法 | 分光镜 | 激发滤光片 | 截止滤光片 |
FL-B | DM505 | BP460-495 | BA510 |
FL-FITC | DM505 | BP460-495 | BA510-550 |
二、
·罗丹明,TRITC,荧光抗体
·碘:DNA。
·RFP
激发方法 | 分光镜 | 激发滤光片 | 截止滤光片 |
FL-G | DM570 | BP510-550 | BA590 |
FL-TRITC | DM565 | BP528-553 | BA578-633 |
三、
·自发荧光观察
·DAPI:DNA染色
·Hoechest 332528, 33342:用于染色体染色
激发方法 | 分光镜 | 激发滤光片 | 截止滤光片 |
FL-U | DM400 | BP330-385 | BA420 |
F-DAPI | DM415 | BP360-390 | BA435-485 |
四、
·几茶酚胺·5-羟色胺
·四环素:骨骼,牙齿
激发方法 | 分光镜 | 激发滤光片 | 截止滤光片 |
FL-V | DM455 | BP400-410 | BA455 |
五、
·cy5
·Alexa Fluor 633,Alexa Fluor 647
激发方法 | 分光镜 | 激发滤光片 | 截止滤光片 |
R | DM660 | BP620-650 | BA670-750 |
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