小鼠稳态树突状细胞培养试剂盒

小鼠稳态树突状细胞培养试剂盒是为在体外培养和诱导小鼠造血前体细胞向成熟树突状细胞（DC）亚群分化发育而专门设计的一款含血清培养基套装。该培养试剂盒可在10天内同时诱导不同DC亚群产生，主要包括传统型cDC2（CD11c+ MHCII+ CD11b+B220-）和浆细胞样pDC（CD11cmod MHCIIlow B220+PDCA1+），是研究不同亚群DC分化发育和功能、以及产生小鼠DC疫苗的重要培养系统。

产品特点
针对培养小鼠成熟树突状细胞而设计，效果显著

产品成分

完全培养基配制
（在无菌生物安全柜中，开展以下操作）
  1.在4℃冰箱解冻补充因子和胎牛血清，混匀后使用。
注：解冻后的补充因子和血清可放置于4℃冰箱，在1个月内使用；或者分装至合适体积后，保存于-20℃冰箱，不可反复冻融！
  2.将1体积的补充因子和10体积的血清加入到89体积的基础培养基中，充分混匀，得到小鼠稳态树突状细胞完全培养基。如取100ul补充因子和1ml血清加入至8.9ml基础培养基，以此类推。
注：配好的完全培养基请于4℃保存，且于1个月内使用完毕。

使用说明
（请详细阅读使用说明后再开始相关实验）
  1.使用淋巴细胞分离液从小鼠骨髓总细胞中分离得到骨髓单个核细胞（BM-MNC），计数。
  2.D0：使用完全培养基重悬BM-MNC，调整细胞密度至1.5*10^6/ml，按照如下表格所示将细胞铺于培养板：

  3.将培养板置于细胞培养箱，37℃，5%CO2，静置培养。
  4.D3：半量换液。小心从原来的培养板孔中取出一半原有培养基，加入等量新鲜完全培养基。
注：完全培养基请恢复至室温后使用，减少对细胞的刺激；
      考虑到培养过程中的液体挥发，加入新鲜完全培养基时，可考虑多加10%体积完全培养基。
  5.D6：半量换液。同第4步。
  6.D10：轻轻吹打细胞，收集悬浮细胞，即为分化成熟的小鼠稳态DC，可进行后续操作和分析。
注：如需研究特定刺激对DC的影响，可提前加入相应刺激，待D10收集细胞进行分析。

数据展示

图：小鼠稳态树突状细胞亚群分布。取4-6周龄雄性C57BL/6小鼠BM-MNC按照上述说明培养至第10天，收集悬浮细胞检测DC产生和亚群分布。