河豚毒素检测应用方案

仪器配置

  液相色谱仪、荧光检测器、输液泵、系统控制器、柱温箱、莱博瑞特柱后衍生仪

色谱条件

  检测波长：波长384nm  发射波长505nm

  流动相：

A: 10mmol庚激发烷磺酸钠+50mmol磷酸二氢钠+50mmol磷酸氢二钠  

B: 乙腈

流速：0.4mL/min

柱温：室温

进样量：10uL

衍生试剂：莱博瑞特河豚毒素衍生试剂包

柱子：莱博瑞特C18柱

检测

  河豚毒素标准溶液：10ug/mL

  标准溶液制备：0.03%乙酸溶液，0.45um过滤膜过滤

  保留时间：14.413min

                        图1河豚毒素

线性分析

河豚毒素是鲀鱼类（俗称河豚鱼）及其它生物体内含有的一种生物碱、为氨基全氢喹唑啉型化合物，是自然界中所发现的毒性最大的神经毒素之一，曾一度被认为是自然界中毒性最强的非蛋白类毒素。毒素对肠道有局部刺激作用，吸收后迅速作用于神经末梢和神经中枢，可高选择性和高亲和性地阻断神经兴奋膜上钠离子通道，阻碍神经传导，从而引起神经麻痹而致死亡。

河豚毒素缺乏紫外、荧光和光化学特性，利用河豚毒素溶于弱酸的性质进行提取，在强碱中可产生具有荧光性衍生物的原理，采用柱后衍生-高效液相色谱荧光法进行检测。

我们莱博瑞特柱后衍生仪种类多、功能全，完全具备检测河豚毒素的要求，以下为河豚毒素试验谱图：

国家标准要求贝类、鱼类（不含其制品）中河豚毒素的定量限为0.25mg/kg。