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一般来说,在做细胞实验时会将一个实验分为实验组和对照组。实验组是接受实验变量处理的对象组;对照组相对实验组而言,是不接受实验变量处理的对象组。
理论上,因为实验组和对照组受到无关变量的影响相同,所以实验组和对照组的差异,即可认定是来自实验变量的效果。实验人员通过设置实验组和对照组来加强实验结果的可信度,这就要求尽量做到多组、同步进行实验,并可保留相应数据。
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对照组实验案例
1、不同药物对同种细胞的影响实验。
用克隆形成实验检测吗啡、舒芬太尼、布托啡诺对人肺癌细胞A549细胞株增殖的影响,分别用不同浓度的吗啡、舒芬太尼和布托啡诺处理A549细胞7d后,进行细胞克隆形成实验。
![图片](https://img1.17img.cn/17img/images/202208/uepic/00f27768-fbca-4f07-99b1-2d76dbd807a5.jpg)
实验结果显示,当吗啡浓度为101umol/L时,A549细胞的增殖受到抑制,集落单位数目显著少于对照组,结果具有统计学意义;其它浓度吗啡对A549 细胞的增殖的影响不明显。不同浓度的舒芬太尼、布托啡诺均显示阴性结果,即不同浓度的舒芬太尼、布托啡诺未对A549细胞的增殖具有显著影响。
2、同种药物对不同种细胞的影响实验。
为了比较索拉非尼对不同克隆细胞增殖抑制率,对不同细胞培养成克隆细胞群。阴性对照孔只加入培养基,24小时后细胞贴壁。阳性对照组和阴性对照组均不加药物索拉非尼,实验组加入不同浓度药物索拉非尼。
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克隆A(SCLC-1)细胞体积较小,数量最多,结构致密;克隆体较大,边界光滑清楚,细胞呈巢状致密排列,约占单克隆生长细胞孔的13% (2/15)。克隆B(SCLC-2)细胞呈梭形或多边形,排列松散,边界不规则,约占单克隆生长细胞孔的87%(13/15)。
克隆A传代后细胞分裂增殖旺盛,3-4天即可铺满培养瓶壁,连续传代3月达20余代。克隆B传代则需1周余才可铺满培养瓶壁,传代6-8次后细胞毛糙,表面见金黄色颗粒物或褐色絮状物。
加入MTT噻唑兰检测细胞增殖抑制率结论:索拉非尼对克隆A细胞抑制率无明显变化,索拉非尼对克隆B细胞抑制率有明显变化。
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Cellaview赛乐微的对照组实验
一般来说,实验室都是靠人工观测记录细胞生长的,需要实验人员定期将培养中的细胞取出放在显微镜下进行观测并记录相应数据。一旦对照组数量增多,那么人工很难做到多组、同步进行观测记录并记录准确数据。而且,人工频繁拿出细胞并观测的操作,也很容易导致细胞污染,使得研究前功尽弃。
所以,为解决以上这些实际问题,力显智能研发团队综合研发了这样一款细胞智能监控助手——Cellaview赛乐微。它的核心优势在于它可以7x24小时的实时智能监控并记录细胞生长状态,且因为体积足够小,能够直接连同培养皿放进培养箱,可以一边培养一边观测,再也不用担心频繁拿取会造成细胞污染了。
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以秋水仙素对海拉细胞增殖抑制效果实验为例(30ng/ml浓度秋水仙素),可使用Cellaview赛乐微作如下对照实验。正常培养的海拉细胞为对照组、未加药组(加入等体积30 ng/mLNacl处理12h的Hela细胞)、加药组(加入30 ng/ml秋水仙素给药处理12h的Hela细胞),随后同步放入培养箱,培养条件 95%CO₂、5%O₂,37℃。
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实验结论:秋水仙素对海拉细胞增殖有着明显的抑制效果,若想进一步探究不同浓度秋水仙素对海拉细胞增殖的抑制程度,还需要进一步作对比试验。
如上,Cellaview赛乐微很好满足了对照组实验多组、同步、可保留数据的需求。Cellaview赛乐微的PC端后台也可支持多达4台仪器的同步连接,可以应用于不同因素下对同种细胞的影响、同因素下对不同细胞的影响的类型实验,可为实验提供多组同步的对照参考依据,给细胞实验研究带来极大帮助。
![图片](https://img1.17img.cn/17img/images/202208/uepic/223088c7-9a29-4028-b78c-2fdcbf055784.jpg)
Cellaview赛乐微完美适用于细胞划痕、汇合度识别、类器官培养监测、肿瘤球增殖监测、胚胎干细胞生长监测等大多数细胞生长研究,为细胞质量控制和监控提供了极大帮助。
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参考文献:
[1]李彬. 不同类型阿片类药物对肺癌细胞系A549增殖、迁移的影响[D].西南医科大学,2018.
[2] 文加斌. NCI-H446人小细胞肺癌细胞株细胞亚群克隆异质性与肿瘤干细胞的实验研究[D]. 辽宁:大连医科大学,2009. DOI:10.7666/d.y1557668.
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图6、培养箱中的Cellaview赛乐微细胞智能监控助手
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宁波力显智能科技有限公司(INVIEW)是专业从事超高分辨率显微技术和产品研发的科技企业,依托复旦大学的自动控制、新一代信息技术及香港科技大学的生物、光学、图像处理等的技术,拥有光学、生物、自控、机械、信息技术等多领域交叉学科技术团队,将2014年诺贝尔化学奖技术产业化,推出了超高分辨率显微成像系统iSTORM、细胞智能监控助手Cellaview等一系列产品,帮助人们以前所未有的视角观察微观世界,突破极限,见所未见。