5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-吡喃半乳糖苷
X-GAL
产品规格: 500mg,1g
保存条件: -20℃保存
产品描述:
X-Gal 是β-半乳糖苷酶(β-galactosidase)的显色底物,在β-半乳糖苷酶的催化下会产生蓝色产物。常用于β-半乳糖苷酶的原位染色检测以及蓝白斑筛选。
产品性质:
![blob.png blob.png](https://img1.17img.cn/17img/images/202303/uepic/3d4d2261-d63e-4873-869b-53b8d0c24afb.jpg)
配制储存液:
称取 200mg X-Gal 于 15 mL 离心管,向其中加入 10mL DMF,旋涡震荡使其充分溶解后,建议分装,-20℃避光保存,有效期可达 6-12 个月。
蓝白斑筛选:
1. X-Gal、IPTG 加入琼脂培养基溶液
1)高压灭菌已加琼脂的培养基,并冷却到 50℃左右。
2)每毫升培养基内加入 10 μL 20 mg/mL X-gal 溶液、10 μL 0.1 M 的 IPTG(使其终浓度达到 1 mM);
3)加入适量抗生素;
4)混匀后按照平板大小倒入适量培养基,待培养基冷却至室温后,接种细菌于 37℃过夜培养。
2. X-Gal、IPTG 加到琼脂平板表面
1)于无菌超净工作台制备平板(如 LB 琼脂板); 2)取 40 μL 100 mM IPTG 和 120μL 20 mg/mL X-gal 混合,均匀地涂布于准备好的平板上;
注:平板边缘较难充分涂布均匀,容易产生假阳性,因此,为了得到更好结果,建议后续操作中尽可能在平板中间挑取单克隆。
3)37℃孵育直至所有液体被吸收(30 min 或更长)。接种细菌于 37℃过夜培养。
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
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