Lowry 法蛋白定量试剂盒说明书
Lowry method of Protein Assay Kit
规格:1000T(微量法)/100T(分光光度法)
产品信息:
产品简介:
斐林-酚法用于蛋白质的定量测定,包括两步反应:第一步,蛋白质在碱性溶液中与铜
离子作用形成铜-蛋白复合物;第二步,铜-蛋白复合物加入酚试剂后,产生蓝色化合物,该
蓝色化合物在波长 650nm 处的吸光度与蛋白质的含量成正比,根据检测样品的吸光度,计
算样品的蛋白质含量。
Folin 试剂显色反应是由酪氨酸、色氨酸和半胱氨酸引起,因此样品中的酚类、柠檬酸
和巯基化合物均会有干扰作用;此外,不同蛋白质因酪氨酸、色氨酸含量不同而使显色强度
稍有不同。
本蛋白定量试剂盒的检测范围为 50ug/ml 至 500ug/ml。
使用说明:
1. 依据实验用量,将 Folin 酚甲试剂 A 和 B 按体积比 50:1 混合,现配现用
2. 取适量 BSA 标准品用 PBS 稀释 10 倍至浓度 0.5mg/ml
>微量法:
3. 将标准品按 0、2、4、6、8、12、16、20ul 加到 96 孔板中,并加检测缓冲液补足到 20ul;为减小实验误差,可按上述比例预先配制不同浓度的标准品,然后每孔加入 20ul
4. 将样品作适当稀释,也按每孔 20ul 加入 96 孔板中
5. 将配好的 Folin 酚甲试剂每孔加入 200ul,轻轻震动,混匀,室温放置 10min
6. 各孔加入 20ul Folin 酚乙试剂,迅速混匀,37℃ 孵育 30min。用酶标仪测定 A650,计算蛋白浓度
>分光光度法:(上接步骤 2)
3. 取 8 支或更多 5ml 离心管,并进行编号,然后按下表加入试剂
4. 用分光光度计测 650nm 波长处的吸光度值,记录结果,并使用 Excel 制作标准曲线,根据公式推测所测样品的浓度。
参考标准曲线:
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
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