柱式病毒RNA-DNA双提试剂盒(柱式病毒DNA-RNAout)
产品及特点 本产品是在基因柱式病毒 DNAOUT 的基础上开发的、专门用于从血清(血浆) 等液体样品及拭子(咽拭子、鼻拭子、口腔拭子、阴道拭子等)中提取微量病毒 DNA 和 RNA 的产品,它具有下列特点:
1. 本产品可用于病毒 RNA、病毒 DNA 提取以及 DNA 和 RNA 双提取。
2. 操作简单,整个过程只需要 20 分钟左右。
3. 灵敏度高,通过 PCR 检测到的最终灵敏度可以达到 30-50 拷贝/mL。
4. 安全无毒,不需要使用苯酚和氯仿等有机溶液。
5. 与 PCR 和荧光 PCR 兼容。所得 DNA 可用于 PCR、酶切等实验;RNA 可用于 RT-PCR 和 Northern 杂交等实验。
6. 价廉物美,性价比远高于国外同类产品。
7. 适用于各种材料,包括血清、血浆、脑脊液、尿液、粪便、培养细胞上清液等无 细胞材料。
规格及成分:
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运输及保存 常温运输及保存,有效期一年。
自备试剂 无,但需要自备 RNase-free 的 1.5 mL 离心管(耗材)。
使用方法
1. 对于液体病毒样品:在 1.5 mL 离心管中加入 0.1-0.2 mL 液体病毒样品。如 果病毒需要富集,可以将 1.5 mL 液体在 4℃ 24,000 g 冷冻离心 60 分钟,移 弃1.3 mL 后剩下的 0.2 mL 用于第 2 步处理。 对于拭子样品:将一个拭子放入离心管中,加入 1mL 自备的生理盐水,振荡器 上充分振荡半分钟后转移 0.2 mL 到 1.5 mL 塑料离心管中,用于第 2 步处理。
2. 加入 0.6 mL 溶液 A 到第一步得到的 0.2 mL 样品中,振荡 30 秒混匀后室温 放置 10 分钟。注意:溶液 A 在 4℃放置后可能会产生沉淀,使用前必须放在 65℃水浴使沉淀彻底溶解并充分摇匀后再取用。
3. 加入 0.8mL 上柱结合液到离心管中,颠倒混匀后转移一半的混合液(0.8mL) 到离心吸附柱中,室温放置 2 分钟。
4. 12,000 rpm 室温离心 1 分钟,弃收集管中的穿透液,把离心吸附柱放回到收集 上柱结合液 40 mL 编号 130971a 130971b 130971sc 60911 71207 60408 管中。
5. 将剩余溶液短暂离心后全部转移到步骤 3 的离心吸附柱中,室温放置 2 分钟。
6. 12,000 rpm 室温离心 1 分钟,弃收集管中的穿透液,把离心吸附柱放回到收 集管中。
7. 加入 0.7 mL 通用洗柱液到离心吸附柱中,12,000 rmp 室温离心 1 分钟,弃 收集管中的穿透液,把离心吸附柱放回到收集管中。
8. 12,000 rpm 室温离心 1 分钟(干甩),弃含穿透液的离心管。
9. 将干甩后的离心吸附柱套入到一个自备的 RNase-free 的 1.5 mL 离心管中,在 离心吸附柱的滤膜的中部加入 30-100 μL 洗脱液,然后室温放置 2 分钟。
10. 12,000 rpm 室温离心 1 分钟,离心管中的溶液即为病毒 DNA 和 RNA 溶液。
11. 所得溶液可以直接用于 PCR、RT-PCR 等实验,也可放-20℃长期保存备用。
相关资料
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