植物蔗糖含量检测试剂盒 可见分光光度法

植物蔗糖含量检测试剂盒说明书

可见分光光度法

规格：50T/48S

产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致

产品说明：

蔗糖是植物光合作用的主要产物，也是糖分运输和储藏的主要形式。因此，测定蔗糖含量对于植物糖代谢具有重要意义。此外，蔗糖含量是饮料﹑蜂蜜、果脯﹑糖果和乳制品等产品质量控制的重要指标之一。先用碱与样本共热，破坏其中的还原糖。然后在酸性条件下将蔗糖水解生成葡萄糖和果糖，果糖进一步与间苯二酚反应，生成有色物质，在480nm 下有特征吸收峰。

技术指标：

最 低检出限：0.0148 mg/mL

线性范围：0.0195-6 mg/mL

注意：实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

需自备的仪器和用品：

可见分光光度计、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵/匀浆器、蒸馏水。

操作步骤：

一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）

称取0.1~0.2g 样本，常温研碎，加入1mL 提取液，适当研磨后快速转移到离心管中，置于80℃水浴锅中10min，振荡3~5 次，冷却后，4000g，25℃离心10min，取上清，加入2mg试剂五，80℃脱色30min，再加入1mL 提取液，4000g，25℃离心10min，取上清液测定。

二、测定步骤

1、 可见分光光度计预热30min 以上，调节波长至480nm，蒸馏水调零。

2、 样本测定（在1.5mL EP管中依次加入下列试剂）：

混匀，沸水浴 10min，冷却后测定 480nm 处吸光值，空白管、标准管和测定管分别记为 A1、A2 和 A3。

三、蔗糖含量计算

1、 按照样本蛋白浓度计算

蔗糖含量 (mg/mg prot) = (C 标准管×V1)×(A3-A1)÷(A2-A1) ÷(V1×Cpr)= (A3-A1)÷(A2-A1) ÷Cpr此法需要自行测定蛋白浓度。

2、按照样本质量计算

蔗糖含量 (mg/g 质量) = (C 标准管×V1)×(A3-A1)÷(A2-A1)÷(W×V1÷V2) = 2×(A3-A1)÷(A2-A1)÷W

C 标准管：标准管浓度，1mg/mL；V1：加入样本体积，0.1mL；V2：加入提取液体积，2mL；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本质量，g。

注意事项：

当样本吸光值大于 1.1 时，建议将样本用提取液稀释后进行测定。

特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！