土壤木质素过氧化物酶（S-LiP）检测试剂盒 紫外分光光度法

土壤木质素过氧化物酶（S-Lip）活性检测试剂盒说明书

紫外分光光度法

注意：本产品试剂有所变动，请注意并严格按照该说明书操作。

规格：50T/24S

产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致

溶液的配制：

1. 试剂二：临用前取1瓶加入2.5 mL乙醇溶解，用不完的试剂可以2-8℃保存2周，实验前再将试剂二用乙醇稀释10倍备用，用多少配多少。（1瓶粉剂溶解后可做50T，为了延长使用时间，此产品多给1瓶粉剂）

2. 试剂三：使用前请离心再用。取 2μL 试剂三加入 1mL 蒸馏水充分混合备用（约 20T 的量），现用现配，也可根据样本量按比例配制。

产品说明：

木质素过氧化物酶（EC1.11.1.14）是一种含亚铁血红素的过氧化物酶，属于木质素降解酶系，在木质素生物降解、造纸工业、纺织工业、芳香化合物转化与降解及环境污染控制等方面具有较大的应用潜力。木质素过氧化物酶氧化藜芦醇生成藜芦醛，在310nm处有特征吸收峰。

注意：实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

需自备的仪器和用品：

天平、低温离心机、紫外分光光度计、1mL石英比色皿、移液器，水浴锅、震荡仪、甲苯（不允许快递）、乙醇（不允许快递）、30-50目筛、研钵、蒸馏水。

操作步骤：

一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）

新鲜土样自然风干或 37℃烘箱风干，过 30~50 目筛。

二、测定步骤

1. 紫外分光光度计预热30min以上，波长调至310nm，蒸馏水调零。

2. 样本测定（1.5mL EP管）：

三、酶活计算公式

酶活性定义：每克土壤每分钟生成1nmol 藜芦醛所需的酶量为一个酶活力单位。

S-LiP 活性（U/g 土样）=ΔA÷(ε×d) ×10⁹×V反总÷W÷T=1.792×ΔA÷W

ε：藜芦醛摩尔消光系数：9300L/mol/cm；d：比色皿光径，1cm；V反总：反应总体积，1mL=0.001L；W：土

样质量，g；T：反应时间，60min；10⁹：单位换算系数，1mol=109nmol。

实验实例：

1、 称取两份 0.1g 土样于 1.5mLEP 管中，分别为测定管及对照管，之后按照测定步骤操作，测得计算 ΔA=A 测定

管-A 对照管=1.393-1.012=0.381，按土样质量计算酶活得：

S-LiP 活性（U/g 土样）=1.792×ΔA÷W=1.792×0.381÷0.1=6.828 U/g 土样。

2、 称取两份 0.1g 三叶草土样于 1.5mLEP 管中，分别为测定管及对照管，之后按照测定步骤操作，测得计算 ΔA=A

测定管-A 对照管=1.296-0.963=0.333，按土样质量计算酶活得：

S-LiP 活性（U/g 土样）=1.792×ΔA÷W=1.792×0.333÷0.1=5.967 U/g 土样。

特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！