50X柠檬酸钠抗原修复液

产品概述

细胞或组织用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定后，会导致蛋白之间的交联(cross-link)，许多氨基酸残基在分子内或分子间形成了醛键，使得不少抗原决定簇被封闭，导致免疫染色时染色信号减弱，甚至出现一些假阳性染色结果。柠檬酸钠抗原修复液(Citrate Antigen Retrieval Solution)是一种最常用的抗原修复液，可以用于石蜡切片、冰冻切片等样品使用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定后的抗原修复。 本抗原修复液采用了广泛使用的柠檬酸钠缓冲液(pH6.0)，可以有效去除醛类固定试剂导致的蛋白之间的交联，充分暴露石蜡切片等样品中的抗原表位，从而大大改善免疫染色效果。 石蜡切片都需进行抗原修复处理，抗原修复会大大改善石蜡切片的免疫染色效果。冰冻切片可以不进行抗原修复处理，但当冰冻切片免疫染色效果欠佳时，可以考虑尝试进行抗原修复，修复后免疫染色效果会有显著改善。 按照每个片子需要10ml抗原修复缓冲液（1x）计算，100ml抗原修复缓冲液（50x）可以用于500个样本的抗原修复。  可以提供针对动物细胞、组织、植物、真菌、酵母、微生物、藻类、液体、土壤等各种不同样本的蛋白提取试剂盒。可以提供针对细胞膜、核、胞质、线粒体、溶酶体、高尔基体、内质网、外泌体等细胞不同部位的蛋白提取试剂盒。可以提供针对下游实验不同应用的试剂盒，例如用于Western Blotting和双向电泳等不同下游应用的试剂盒；含去垢剂成分和不含去污剂成分的蛋白提取试剂盒；专用于蛋白质谱检测、Pull-down实验的试剂盒等总计300多种蛋白提取试剂盒供选择使用。可以提供针对动物、植物等不同样本的细胞核、线粒体、溶酶体、叶绿体、外泌体等不同细胞器的提取试剂盒。可以提供蛋白浓缩、脱盐、沉淀、透析、定量、电泳、纯化、检测等不同蛋白样品处理检测等相关试剂盒。

保存温度

2-8℃保存

注意事项

1.开盖后组份按要求条件保存。

2.拆封后请尽快使用完！

有效期

一年

适用样本

石蜡切片 冰冻切片

仪器准备

1.加热设备

试剂准备

1.系列乙醇

2.纯水

3.免疫染色洗涤液

耗材准备

1.一次性手套

使用注意事项

1.抗原热修复并不是所有抗体都适用。

2.注意加热过程液面不要低于片子，要防止切片干燥，热处理后应注意自然冷却。

3.一批抗原的检测其温度和时间一定保持一致。

4.浸泡在抗原修复缓冲液（1x）中，最jia的加热时间需1.根据不同的样品和目的蛋白自行摸索。

5.用过的柠檬酸缓冲液不能反复使用。

使用方法

柠檬酸钠抗原修复缓冲液（50x）使用前用纯水50倍稀释，即为1x。

一、石蜡切片：

1. 脱蜡：

切片在二甲苯中脱蜡3~5分钟，再换用新鲜的二甲苯脱蜡，共用二甲苯脱蜡3次；

无水乙醇3~5分钟，两次；

95%乙醇3~5分钟，一次；

90%乙醇3~5分钟，一次；

80%乙醇3~5分钟，一次；

70%乙醇3~5分钟，一次；

蒸馏水冲洗3~5分钟，两次。

2. 抗原修复：

用免疫染色洗涤液洗涤切片5min；

将切片浸泡在抗原修复缓冲液(1X)中，95-100℃加热约20分钟(加热时间可以控制在10-30分钟内，最jia的加热时间需根据不同的样品和目的蛋白自行摸索)。

抗原修复液(1X)使用前需预热到95-100℃。加热可以使用普通的水浴锅，也可以使用微波炉加热。如果使用微波炉加热，需注意避免沸腾和过多的水分蒸发，可在高火加热液体至所需温度之后，将微波炉打到低火上。随后取出自然冷却至室温。

用免疫染色洗涤液洗涤1-2次，每次3-5，min。

随后即可进行封闭等后续的免疫染色步骤。

二、冰冻切片：

用免疫染色洗涤液洗涤切片5分钟。

将切片浸泡在抗原修复液(1X)中，95-100℃加热约20分钟(加热时间可以控制在10-30分钟内，最jia的加热时间需根据不同的样品和目的蛋白自行摸索)。

抗原修复液(1X)使用前需预热到95-100℃。加热可以使用普通的水浴锅，也可以使用微波炉加热。如果使用微波炉加热，需注意避免暴沸和过多的水分蒸发。随后大约在20-30分钟内冷却至室温。

用免疫染色洗涤液洗涤1-2次，每次3-5分钟。

随后即可进行封闭等后续的免疫染色步骤。

三、其他样本：

对于其它样品的抗原修复，可以参考石蜡切片或冰冻切片的步骤进行。

特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！