双缩脲蛋白定量试剂盒
产品概述
双缩脲是一种用于分析蛋白质的方法,双缩脲反应的原理是在呈蓝色的碱性硫酸铜溶液存在的情况下,肽键与铜离子结合,生成蓝紫色的化合物,此化合物在540nm的吸光度与肽键的数量呈正比例关系,因此可计算出蛋白质的含量。 双缩脲法测蛋白浓度兼容性亦很好,不受大部分样本中其他成分的影响,但易受铜离子螯合剂的影响。另外,对于血清总蛋白的双缩脲分析,胆红素、脂类、血红蛋白、葡聚糖具有一定干扰作用。 双缩脲法在5~160mg/ml浓度范围内有较好的线性关系。 本试剂盒仅用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。 可以提供针对动物细胞、组织、植物、真菌、酵母、微生物、藻类、液体、土壤等各种不同样本的蛋白提取试剂盒。可以提供针对细胞膜、核、胞质、线粒体、溶酶体、高尔基体、内质网、外泌体等细胞不同部位的蛋白提取试剂盒。可以提供针对下游实验不同应用的试剂盒,例如用于Western Blotting和双向电泳等不同下游应用的试剂盒;含去垢剂成分和不含去污剂成分的蛋白提取试剂盒;专用于蛋白质谱检测、Pull-down实验的试剂盒等总计300多种蛋白提取试剂盒供选择使用。 可以提供针对动物、植物等不同样本的细胞核、线粒体、溶酶体、叶绿体、外泌体等不同细胞器的提取试剂盒。可以提供蛋白浓缩、脱盐、沉淀、透析、定量、电泳、纯化、检测等不同蛋白样品处理检测等相关试剂盒。
保存温度
2-8℃
注意事项
1.试剂拆封后请尽快使用完!
2.蛋白标准配制成溶液后要-20℃保存。
有效期
一年
检测方法
酶标仪或分光光度计
适用样本
蛋白样本
产品应用
蛋白定量
仪器准备
1.酶标仪或分光光度计
2.移液器
3.冰箱
4.冰盒
试剂准备
1.纯水 2.生理盐水
耗材准备
1.离心管
2.吸头
3.一次性手套
4.96孔板
使用注意事项
1.旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。
2.蛋白标准粉末溶解于蛋白标准配制液后,即获得蛋白标准原液;该原液中含有防腐剂,不影响后续检测,该蛋白标准原液-20℃长期保存;
3.待测蛋白和蛋白标准加入双缩脲试剂A 后,如果发现检测效果不佳,可以室温放置1h或60℃放置15min,颜色会随着时间的延长而不断加深;
4.测定标准曲线时发现随着标准品浓度的增加,吸光度或颜色没有明显变化,可能的原因是样品中含有铜离子螯合剂;
5.蛋白浓度低于20mg/ml时,颜色反应呈不明显的蓝色;当大于40mg/ml时,即可呈现明显的蓝紫色反应;
6.本试剂盒的线性范围是5~160mg/ml,样品蛋白浓度应大于1mg/ml,以20mg/ml上为宜;如果需测定低浓度蛋白样品(1mg/ml),请选择BCA蛋白定量试剂盒(BB-3401);
7.本产品反应生成的蓝紫色的化合物的吸光度,与试剂批次、pH值、反应温度有关;因此建议,每次测定都做标准对照;
8.氨基酸和二肽不发生双缩脲反应,三肽、寡肽和多肽与铜离子的双缩脲复合物,呈粉红色-紫红色,与蛋白质的双缩脲反应结果不同;
9.如果没有酶标仪,也可以使用分光光度计测定。使用分光光度计测定蛋白浓度时,每个试剂盒可以测定的样品数量会显著减少;
10.检测中发现所有孔都呈暗紫色,可能原因是样品中含有还原剂,应适当透析或稀释样品。
使用方法
1. 取0.25ml蛋白标准配制液C或稀释液加入到40mg的蛋白标准B中,充分溶解后配制成蛋白标准溶液(160mg/ml),配制后可立即使用;溶解后的蛋白标准应-20℃保存。也可根据需要进行稀释,如稀释至40mg/ml;
2. 将标准品按0,1,2,4,8,12,16,20ul加到96孔板的标准孔,加稀释液补足至20ul;
3. 加适当体积待测蛋白样本到96孔板的样品孔中。
4. 各孔中加入200ul双缩脲试剂A,室温静置10~15min;
5. 测定540nm波长处的吸光值,如无540nm,510~562nm之间的波长也可;
6. 根据标准曲线计算出样品的蛋白浓度;
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
双缩脲蛋白定量试剂盒信息由上海博尔森生物科技有限公司为您提供,如您想了解更多关于双缩脲蛋白定量试剂盒报价、型号、参数等信息,欢迎来电或留言咨询。除供应双缩脲蛋白定量试剂盒外,上海博尔森生物科技有限公司还可为您提供Influenza A H3N8 (A/equine/Gansu/7/2008) Hemagglutinin、SARS-CoV-2 (2019-nCoV) Spike S1 (Q677H) Protein (His Tag)、SARS-CoV-2 Spike RBD (L452R, E484Q) Protein (His & AVI Tag)等产品,公司有专业的客户服务团队,是您值得信赖的合作伙伴。