酵母高尔基体提取试剂盒
产品概述
高尔基体(Golgi apparatus, Golgi bodies)是由许多扁平的囊泡构成的以分泌为主要功能的细胞器。又称高尔基器或高尔基复合体;高尔基体是由数个扁平囊泡堆在一起形成的高度有极性的细胞器。常分布于内质网与细胞膜之间,呈弓形或半球形,凸出的一面对着内质网称为形成面(forming face)或顺面(cis face)。凹进的一面对着质膜称为成熟面(mature face)或反面(trans face)。顺面和反面都有一些或大或小的运输小泡,在具有极性的细胞中,高尔基体常大量分布于分泌端的细胞质中。因其看上极像滑面内质网,因此有科学家认为它是由滑面内质网进化而来的。 高尔基体的主要功能将内质网合成的蛋白质进行加工、对比分类、与包装,然后分门别类地送到细胞特定的部位或分泌到细胞外。高尔基体中的酶主要有糖基转移酶、磺基-糖基转移酶、氧化还原酶、磷酸酶、蛋白激酶、甘露糖苷酶、转移酶和磷脂酶等不同的类型。 酵母高尔基体提取试剂盒提供全套试剂,适用于从各种酵母样品中提取高尔基体。提取过程简单方便。 本试剂盒不能用于冷冻酵母样品的高尔基体提取。 本试剂盒提取的为完整的高尔基体,可以用于下游的高尔基体功能研究,或者用于蛋白裂解提取高尔基体蛋白。 可以提供针对动物细胞、组织、植物、真菌、酵母、微生物、藻类、液体、土壤等各种不同样本的蛋白提取试剂盒。
保存温度
2-8℃
注意事项
1.提取液B长期不用时-20℃保存。
2.酵母洗涤液D长期不用时-20℃保存。
3.试剂拆封后请尽快使用完!
有效期
一年
检测方法
提取
适用样本
酵母
产品应用
根据需要使用
仪器准备
1.离心机
2.振荡器
3.涡旋混匀器
4.移液器
5.冰箱
6.冰盒
试剂准备
1.PBS缓冲液 (pH7.4,实验室常用的10mM磷酸缓冲盐溶液(1X)) (phosphate buffer saline/Dulbecco’s PBS:约含8mM Na2HPO4、2mM KH2PO4、137mM NaCl和3mM KCl)
耗材准备
1.离心管
2.吸头
3.一次性手套
使用注意事项
1.旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。
2.实验过程中的所有试剂须预冷;所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
使用方法
1. 酵母培养物,在4℃,1000×g条件下离心5-10分钟,小心吸取培养基,尽可能吸干,收集酵母沉淀。
2. 用PBS洗涤酵母两次,每次洗涤后尽可能吸干上清。
3. 每100ul体积或100mg湿重酵母沉淀物中加入400ul酵母高尔基体提取液A,混匀后,在30℃条件下保温15分钟。
4. 在1000×g条件下离心5-10分钟,收集酵母沉淀。
5. 用300ul酵母洗涤液D洗涤酵母两次,离心收集酵母。
6. 酵母沉淀物中加入500ul酵母高尔基体提取液B,充分混匀后。
7. 在37℃或室温条件下轻微振荡60-90分钟。
8. 在2000×g条件下离心5-10分钟,弃上清,收集沉淀。
9. 沉淀用PBS洗涤两次。2000×g离心收集沉淀。
10. 在沉淀中加入400μl酵母高尔基体提取液 C,充分混匀,然后在振荡器上振荡10-30分钟。
11. 在4℃,500×g条件下离心5分钟,弃沉淀,收集上清。
12. 将上清在4℃,3000×g力条件下离心10分钟。弃沉淀,收集上清。
13. 将上清在4℃,5000×g力条件下离心10分钟。弃沉淀,收集上清。
14. 将上清在4℃,20000×g条件下离心20分钟。弃上清,留沉淀。
15. 在沉淀中加入400μl高尔基体保存液E,混匀。
16. 在4℃,20000×g条件下离心30分钟。弃上清,收集沉淀。即得到酵母高尔基体样品。
17. 根据下游实验需要,将沉淀用相应的缓冲溶液重悬。置冰箱备用或直接用于下游实验。
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
酵母高尔基体提取试剂盒信息由上海博尔森生物科技有限公司为您提供,如您想了解更多关于酵母高尔基体提取试剂盒报价、型号、参数等信息,欢迎来电或留言咨询。除供应酵母高尔基体提取试剂盒外,上海博尔森生物科技有限公司还可为您提供SARS-CoV-2 Nucleocapsid (G18S, A119S, A217S, M234I, E367Q)、SARS-CoV-2 (2019-nCoV) Spike RBD(D405V, Q414A)-His、Qinghai Hemagglutinin Protein (HA1 Subunit) (His Tag)等产品,公司有专业的客户服务团队,是您值得信赖的合作伙伴。