叶绿体提取试剂盒

产品概述

叶绿体是植物细胞所特有的能量转换细胞器，光合作用就是在叶绿体中进行的, 由于具有这一重要功能，所以叶绿体一直是细胞生物学、遗传学和分子生物学的重要研究对象。 叶绿体提取试剂盒用简便快速的方法即可快速提取得到叶绿体。 本试剂盒适用于提取新鲜植物样本的叶绿体，用于冻存样本的提取时由于冻存过程中大部分叶绿体会被破坏，叶绿体回收率较低。 叶绿体提取试剂盒提取的叶绿体具有生物活性，可以用于叶绿体功能研究、叶绿体蛋白提取等各种下游应用。 本试剂盒采用非酶法的快速提取方法，可以在一小时内快速提取得到叶绿体，但是回收率比酶法叶绿体提取试剂盒稍低。需要酶法提取试剂盒可以联系选择其他货号的试剂盒，酶法提取得到的叶绿体回收率会有增加，但是耗时较长。请根据不同的需要选择试剂盒。

保存温度

2-8℃

注意事项

1.试剂拆封后请尽快使用完！

有效期

一年

检测方法

提取

适用样本

植物

产品应用

根据需要使用

仪器准备

1.离心机

2.振荡器

3.匀浆机/匀浆器

4.涡旋混匀器

5.移液器

6.冰箱

7.冰盒

试剂准备

1.PBS缓冲液 （pH7.4，实验室常用的10mM磷酸缓冲盐溶液（1X）） （phosphate buffer saline/Dulbecco’s PBS：约含8mM Na2HPO4、2mM KH2PO4、137mM NaCl和3mM KCl）

耗材准备

1.离心管

2.吸头

3.一次性手套 4.细胞筛

使用注意事项

1.离心机转速有相对离心力（RCF，×g）和每分钟转速（RPM）两种表示方式，有些离心机设置有RPM和×g显示切换，但部分离心机没有自动切换功能。需要用下面的公式进行换算：

g=r×1.118×10-5×rpm2 （r 为有效离心半径，即从离心机轴心到离心收集管底部中心位置的长度，单位为厘米) 例如: 转速为3000rpm，有效离心半径为10 cm，则相对离心力（RCF，×g）为=10×1.118×10-5×30002=1006.2（×g）。

使用方法

1. 取500mg-1g新鲜植物样本叶片，洗净擦干后去除叶梗和粗脉。用手术剪刀尽可能剪碎。

2. 加入2ml PBS用组织搅碎机/匀浆机/匀浆器充分匀浆。

3. 将匀浆用100 μm细胞筛过滤。

4. 将滤液在3000×g条件下离心10分钟，弃上清，收集沉淀。

5. 在沉淀中加入1ml提取液A，充分混匀。

6. 用匀浆机/匀浆器充分匀浆。

7. 在3000×g条件下离心10分钟，弃上清，收集沉淀。

8. 在沉淀中加入0.5ml提取液B，充分混匀。

9. 置振荡器振荡20分钟。

10. 在200×g力离心2分钟。弃沉淀，取上清。

11. 在1000×g力离心2分钟。弃沉淀，取上清。

12. 将上清3000×g力离心10分钟。

13. 弃上清，沉淀即为叶绿体。

14. 用400 μl叶绿体悬浮液或其他相应的缓冲液重悬叶绿体，置冰箱备用或直接用于下游实验。

特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！