植物线粒体提取试剂盒-酶法

产品概述

线粒体(mitochondria)是真核细胞中产生能量的重要细胞器。细胞中的能源物质—脂肪、糖、部分氨基酸在此进行最终的氧化，并通过偶联磷酸化生成ATP，供给细胞生理活动之需。对线粒体结构与功能的研究通常是在离体的线粒体上进行的。 植物线粒体提取试剂盒用简便的方法和设备即可提取得到完整的植物线粒体。 本试剂盒适用于提取新鲜植物样本的线粒体，用于冻存样本的提取时由于冻存过程中大部分线粒体可能会被破坏，线粒体回收率较低。 植物线粒体提取试剂盒提取的线粒体核糖体具有生物活性，可以用于线粒体功能研究、蛋白提取等各种下游应用。 本试剂盒采用酶法提取线粒体，相较于非酶法提取，回收率提高，但是耗时较长。如果需要更加快捷的提取试剂盒，可以选择非酶法的提取试剂盒，非酶法提取过程简单方便，速度快，可在1小时内完成，线粒体活性更高，而且绝少交叉污染，但是回收率相比酶法稍低。对提取速度没有要求的话，可以选择酶法提取试剂盒。请根据实际需要选择试剂盒。 可以提供针对动物细胞、组织、植物、真菌、酵母、微生物、藻类、液体、土壤等各种不同样本的蛋白提取试剂盒。 可以提供针对细胞膜、核、胞质、线粒体、溶酶体、高尔基体、内质网、外泌体等细胞不同部位的蛋白提取试剂盒。

保存温度

2-8℃

注意事项

1.提取液2-8℃保存；

2.保存液2-8℃保存。

有效期

一年

检测方法

提取

适用样本

植物

产品应用

根据需要使用

仪器准备

1.离心机

2.振荡器

3.匀浆机/匀浆器

4.涡旋混匀器

5.移液器

6.冰箱

7.冰盒

试剂准备

1.PBS缓冲液 （pH7.4，实验室常用的10mM磷酸缓冲盐溶液（1X）） （phosphate buffer saline/Dulbecco’s PBS：约含8mM Na2HPO4、2mM KH2PO4、137mM NaCl和3mM KCl）

耗材准备

1.离心管

2.吸头

3.一次性手套 4.细胞筛

使用注意事项

1.旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。

2.实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。

使用方法

1. 取500 mg-1 g新鲜植物样本叶片，洗净擦干后去除叶梗和粗脉。用手术剪刀尽可能剪碎。

2. 加入1 ml 试剂A用组织搅碎机/匀浆机/匀浆器匀浆。

3. 将匀浆液用100 um细胞筛过滤。

4. 将滤液在14000×g离心15分钟。弃上清，留沉淀。

5. 在沉淀中加入0.5 ml提取液B，充分混匀。

6. 置振荡器振荡37℃振荡12-72小时。

7. 在10000×g条件下离心15分钟，弃上清，收集沉淀。

8. 在沉淀中加入0.5 ml提取液C，充分混匀。

9. 置振荡器振荡10分钟。

10. 在200×g力离心2分钟。弃沉淀，取上清。

11. 在1000×g力离心2分钟。弃沉淀，取上清。

12. 在3000×g力离心3分钟。弃沉淀，取上清。

13. 将上清10000×g力离心15分钟。弃上清，留沉淀。

14. 沉淀即为线粒体。

15. 用400 μl线粒体保存液D或其他相应的缓冲液重悬沉淀，置冰箱备用或直接用于下游实验。

特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！