组织线粒体提取试剂盒

产品概述

线粒体(mitochondria)是真核细胞中产生能量的重要细胞器。细胞中的能源物质—脂肪、糖、部分氨基酸在此进行最终的氧化，并通过偶联磷酸化生成ATP，供给细胞生理活动之需。对线粒体结构与功能的研究通常是在离体的线粒体上进行的，本试剂盒用简便快速的方法即可在40分钟内提取得到线粒体。 组织线粒体提取试剂盒可用于各种动物实体软、硬组织样本的线粒体提取。 最hao用于新鲜样本的线粒体提取，用于冷冻样品的线粒体提取时回收率较低。  可以提供针对动物细胞、组织、植物、真菌、酵母、微生物、液体、土壤等各种不同样本的蛋白提取试剂盒。可以提供针对不同下游实验应用的试剂盒，例如用于Western Blotting和双向电泳等不同下游应用的试剂盒；含去垢剂成分和不含去污剂成分的蛋白提取试剂盒；专用于蛋白质谱检测、Pull-down实验的试剂盒等总计300多种蛋白提取试剂盒可供选择。 还可以提供针对动物、植物等不同样本的细胞核、线粒体、溶酶体、叶绿体、外泌体等不同细胞器的提取试剂盒。

保存温度

2-8℃

注意事项

1.长期不用可以-20℃保存。

2.试剂拆封后请尽快使用完！

有效期

一年

检测方法

提取

适用样本

动物组织

产品应用

根据需要使用

仪器准备

1.离心机

2.振荡器

3.匀浆机/匀浆器

4.涡旋混匀器

5.移液器

6.冰箱

7.冰盒

试剂准备

1.PBS缓冲液 （pH7.4，实验室常用的10mM磷酸缓冲盐溶液（1X）） （phosphate buffer saline/Dulbecco’s PBS：约含8mM Na2HPO4、2mM KH2PO4、137mM NaCl和3mM KCl）

耗材准备

1.离心管

2.吸头

3.一次性手套

使用注意事项

1.旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。

2.实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。

3.最hao使用Dounce匀浆器匀浆，如果没有Dounce匀浆器，用普通玻璃匀浆器匀浆也可，线粒体回收率会下降。

4.用Dounce匀浆器匀浆匀浆是线粒体提取的关键的步骤，故匀浆前最hao先通过预实验确定不同组织样本的最适匀浆次数，方法是每匀浆 5-10 次后，取 2-3 uL 匀浆液到载玻片上，然后在相差显微镜下观察，完整细胞数量降低到 20%以下为佳。此镜检步骤非必须步骤，但是会影响线粒体的回收率。在样本极难获取的实验中，务必做镜检。

使用方法

1. 取50-100mg新鲜动物组织样本，用PBS洗涤干净。

2. 用剪刀尽可能剪碎，用冷PBS洗涤两次。

3. 加入500μl冷的试剂 A，置冰上10分钟。

4. 用Dounce匀浆器匀浆30-40次。

5. 然后在4℃，500×g条件下离心5分钟。弃沉淀，收集上清。

6. 将上清在4℃，11000×g离心20分钟。弃上清，留沉淀。

7. 在沉淀中加入500μl冷的试剂B，混匀。

8. 在4℃，11000×g离心20分钟。弃上清，留沉淀。

9. 沉淀用线粒体保存液重悬。

10. 即得到线粒体样品，置冰箱备用或直接用于下游实验。

特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！