细菌膜蛋白提取试剂盒（2D电泳用）

产品概述

细菌膜蛋白提取试剂盒（双向电泳用）是一种快速高效的高产膜蛋白提取试剂盒。 细菌膜蛋白提取试剂盒可以从各种革兰氏阳性和阴性细菌中提取膜蛋白，可用于纯化膜蛋白的粗品制备及膜蛋白制备。提取过程简单方便。该试剂盒含有蛋白酶抑制剂混合物和磷酸酶抑制剂混合物，阻止了蛋白酶对蛋白的降解，为提取高质量的蛋白提供了保证。 提取的蛋白样品中不含盐，可以直接用于等电聚焦、双向电泳等。如下游实验不需要直接用于等电聚焦、双向电泳，可选用用于Western Blotting、普通蛋白质电泳、免疫沉淀、ELISA、转录活性分析、Gel shift凝胶阻滞实验、酶活性测定等下游蛋白研究实验的其他试剂盒。

保存温度

2-8℃

注意事项

1.蛋白酶抑制剂未开盖使用前也可以2-8℃储存。开盖使用后-20℃储存。

2.蛋白酶抑制剂在2-8℃低温时是固体状态，从冰箱取出后恢复至室温或37℃短时间水浴，变成液体状态后离心至管底部再开盖。

3.试剂拆封后请尽快使用完！

有效期

一年

检测方法

双向电泳

适用样本

细菌

产品特点

1、 使用方便。

2、 含蛋白稳定剂，提取的蛋白稳定。

3、 紫外检测蛋白浓度时，背景干扰低。

4、 蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包含7种独立的蛋白酶抑制剂；每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。该混合物优化的组成使其可以抑制几乎所有重要的蛋白酶活性，包括丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。

产品应用

双向电泳

仪器准备

1.离心机

2.振荡器

3.涡旋混匀器

4.移液器

5.冰箱

6.冰盒

试剂准备

1.PBS缓冲液

2.蛋白定量试剂盒

耗材准备

1.离心管

2.吸头

3.一次性手套

使用注意事项：

旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。

实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。

蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀，不影响使用，溶解后正常使用。

可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂单品。

提取液A在使用前须一直置于2-8℃条件，否则下游膜蛋白提取时会导致不容易分层。

使用方法

1. 提取液制备：

每500ul冷的提取液A中加入5ul提取液B 和2ul蛋白酶抑制剂混合物，充分混匀后置冰上备用。

2. 离心收集菌体，用PBS洗菌体2次。

3. 按每100-150mg湿重菌体样本加入500ul冷的提取液A（大约菌体和提取液体积比1:3-1:5，完全淹没菌体即可），吹打混匀，在2-8℃振荡1-2小时，至菌体裂解完全，菌体沉淀减少。

4. 将菌液在2-8℃低温下12000×g离心5分钟，取上清。

5. 在37℃水浴10分钟。

6. 在37℃， 1000×g离心3分钟。

7. 此时液体分为2层，小心移除上层溶液，留管底部下层，大约50ul液体。

8. 用1-2倍体积的膜蛋白溶解液溶解该溶液，即得细菌膜蛋白样品。

9. 将上述蛋白提取物定量后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验。

特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！