昆虫质膜蛋白提取试剂盒

产品概述

动物膜蛋白承担各种生物功能，在生命的发展过程中扮演重要角色。膜蛋白样品的制备需要充分考虑到与下游的胶分析及质谱分析等应用配套，因此膜蛋白样本制备成为一个难以逾越的挑战。传统制备膜蛋白样品的方法是使用去污剂和表面活性剂增溶。去污剂处理会使膜蛋白丧失其天然结构，因而妨碍了膜蛋白的功能研究。 昆虫细胞质膜蛋白提取试剂盒是一种基于化学而非去污剂方法的高产膜蛋白提取试剂盒。本试剂盒提供全套试剂，适用于从昆虫组织或培养细胞中温和、高效地抽提质膜蛋白。用本试剂盒抽提和富集到的蛋白包括从分子量很小到很大的蛋白，单次跨膜至7次以上的蛋白，甚至一些大的蛋白复合物。提取过程简单方便，可在1小时内完成。提取的膜蛋白不仅纯度高，保持天然活性，而且绝少交叉污染。 本试剂盒提取的蛋白可用于Western Blotting、蛋白质电泳、免疫沉淀、ELISA、转录活性分析、Gel shift凝胶阻滞实验、酶活性测定等下游蛋白研究实验。 本试剂盒提取的蛋白为具有天然蛋白构象的活性蛋白。 本试剂盒中不含有EDTA，与金属螯和层析等下游应用兼容。

保存温度

2-8℃

注意事项

1.蛋白酶抑制剂未开盖使用前也可以2-8℃储存。开盖使用后-20℃储存。

2.蛋白酶抑制剂在2-8℃低温时是固体状态，从冰箱取出后恢复至室温或37℃短时间水浴，变成液体状态后离心至管底部再开盖。

3.试剂拆封后请尽快使用完！

有效期

一年

检测方法

WB,IP等

适用样本

昆虫

产品特点

1.使用方便，从昆虫细胞，组织中提取蛋白不需经过反复冻融、超声破碎等前处理。

2.将蛋白提取的时间缩短至30分钟-1小时。

3.含蛋白稳定剂，提取的蛋白稳定。

4.紫外检测蛋白浓度时，背景干扰低。

5.蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包含7种独立的蛋白酶抑制剂；每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。该混合物优化的组成使其可以抑制几乎所有重要的蛋白酶活性，包括丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。

产品应用

WB,IP等

仪器准备

1.离心机

2.振荡器

3.涡旋混匀器

4.移液器

5.冰箱

6.冰盒

试剂准备

1.PBS缓冲液

2.蛋白定量试剂盒

耗材准备

1.离心管

2.吸头

3.一次性手套

使用注意事项：

? 旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。

? 实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。

? 蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀，不影响使用，溶解后正常使用。

? 可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂单品。

? 提取液A在使用前须一直置于2-8℃条件，否则下游膜蛋白提取时会导致不容易分层。

? 膜蛋白电泳时loading buffer应该避免煮沸。

? 膜蛋白电泳时可以提高loading buffer的SDS含量。

使用方法

1. 提取液准备：

每500μl冷的蛋白提取液A中加入2μl蛋白酶抑制剂混合物，充分混匀后置冰上备用。

2. 取适量昆虫组织样本用剪刀尽可能剪碎，置于研钵中用液氮研磨。

3. 研磨后加入500μl冷的提取液A，混匀后移入一个预冷的干净离心管中，在2-8℃振荡1小时。

4. 将提取液在2-8℃低温下10000×g离心5分钟，取上清。

5. 在上清中加入10μl抽提液B，充分混匀。

6. 在37℃水浴10分钟。

7. 在37℃，1000×g离心3分钟。

8. 此时溶液会分为2层，小心移除上层，吸取下层管底部膜蛋白部分大约50μl液体。

9. 用50-150μl试剂C溶解该下层溶液，即得质膜蛋白样品。

10. 将上述蛋白提取物定量后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验。

特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！