脂多糖（LPS）提取试剂盒

产品概述

脂多糖（LPS）是革兰氏阴性菌细胞壁外膜的主要成分，结构很复杂、热稳定性极高（在250℃下干热灭菌2h才完全灭活）。受LPS发现的历史原因，如今LPS的概念几乎等同于内毒素（endotoxin）。LPS由多糖链和脂质A组成，不同细菌间的多糖链是高度变化的，决定细菌的血清型；而脂质A主要影响LPS的毒性作用。LPS可以引起免疫刺激的级联反应和机体的毒性病理生理活动，包括释放内毒素引起感染性休克从而导致末梢血管虚脱。临床常通过检测LPS的存在来诊断脑膜炎。 由于LPS与机体免疫机能的密切关系，生命科学研究常常提取LPS进行相关的研究，如阐明LPS的结构，代谢，免疫学，生理学，毒性，生物合成途径；诱导生长促进因子如白介素的合成与分泌；诱导疾病研究的动物模型如炎症反应，急性肺损伤。 LPS提取试剂盒采用简单步骤即可快速提取细菌脂多糖，提取产量高，省时，蛋白质和核酸污染低。

保存温度

2-8℃

注意事项

1.蛋白酶抑制剂未开盖使用前也可以2-8℃储存。开盖使用后-20℃储存。

2.蛋白酶抑制剂在2-8℃低温时是固体状态，从冰箱取出后恢复至室温或37℃短时间水浴，变成液体状态后离心至管底部再开盖。

3.试剂拆封后请尽快使用完！

有效期

一年

检测方法

WB,IP等

适用样本

细菌

产品特点

1.适用性广，能从所有革兰氏阴性菌中提取LPS。

2.操作简单方便。

3.提取LPS下游应用广，包括直接用于免疫刺激

产品应用

WB,IP等

仪器准备

1.离心机

2.振荡器

3.涡旋混匀器

4.移液器

5.冰箱

6.冰盒

试剂准备

1.PBS缓冲液

2.蛋白定量试剂盒

耗材准备

1.离心管

2.吸头

3.一次性手套

使用注意事项：

1.离心机转速有相对离心力（RCF，×g）和每分钟转速（RPM）两种表示方式，有些离心机设置有RPM和×g显示切换，但部分离心机没有自动切换功能。需要用下面的公式进行换算：

g=r×1.118×10-5×rpm2 （r 为有效离心半径，即从离心机轴心到离心收集管底部中心位置的长度，单位为厘米) 例如: 转速为3000rpm，有效离心半径为10 cm，则相对离心力（RCF，×g）为=10×1.118×10-5×30002=1006.2（×g）。

2.可以用试剂盒或者苯酚硫酸法进行脂多糖定量。

使用方法

1. 室温8000×g离心3分钟收获细菌细胞

2. 加入500 μl试剂A重悬细菌，8000×g离心3分钟，弃上清。

3. 收集沉淀，加入500 μl试剂A重悬沉淀，8000×g离心3分钟，弃上清。

4. 收集沉淀，加入500 μl提取液B重悬沉淀。

5. 在150-300w超声10秒间隔10秒，超声5-15分钟。

6. 在10000×g离心10分钟取上清。

7. 在上清中加入500 μl提取液C，剧烈涡旋20秒充分混匀。

8. 在66-68℃水浴或气浴孵育30分钟。中间隔10分钟用移液器轻轻吹打混匀。

9. 置4℃静置过夜。

10. 在4℃，3000×g离心20分钟。

11. 取最上层上清至另一干净离心管，即得脂多糖样品。

特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！