羟自由基检测试剂盒

产品概述

Fenton反应是最常见的产生羟自由基的化学反应，H2O2的量和Fenton反应产生的OH.量成正比，当给予电子受体后，用griess试剂显色，形成红色物质，其呈色与OH的多少成正比关系。 可以提供细胞凋亡、增殖、毒性、活性氧、细胞代谢、氧化应激、细胞膜流动性、膜通透性转换孔、细胞耗氧率、细胞内pH、细胞粘附、细胞自噬等数百种检测试剂盒产品。 可以为您提供各种颜色的M系列、N系列、L系列、E系列、G系列等细胞膜、细胞质、细胞核、溶酶体、线粒体、内质网、高尔基体、骨架、微管等细胞、细胞亚结构荧光染色试剂盒产品，以及钙离子、钠离子、氩离子等各种荧光染色试剂盒产品。

保存温度

2-8℃ 避光

注意事项

开盖后组份按要求条件保存。

有效期

3个月

检测方法

分光光度计

产品应用

分光光度计

仪器准备

1.分光光度计

2.恒温水浴锅

3.移液器

4.漩涡混匀器

试剂准备

1.冰乙酸

2.纯水

耗材准备

1.离心管

2.吸头

使用注意事项

1.必须每一只管子单独做，并且反应时间精确控制在1min；

2.必须严格按照操作表顺序加入试剂，不可配置混合试剂；

3.检测样本溶剂或介质可为生理盐水、纯水，但不能为磷酸缓冲液、无水乙醇等；

4.此法检测灵敏度较高，检测血清（浆）和组织以外的样本时，最hao先取原液及不同浓度稀释后的样本，例如5倍形式液或10倍稀释液做预试；如果样本管颜色太浅可将样本用其溶剂继续稀释至颜色较深为止。

使用方法

试剂配制

1. 0.03%标准品工作液的配制：

按试剂 A储备液：纯水=1：99配制，用多少配多少；

2. 底物工作液配制：

（1）如果样本为抑制羟自由基，即样本管吸光度小于对照管吸光度，底物工作液的配制方法如下：

按试剂 B底物储备液：纯水=1：99配制，用多少配多少；

（2）如果样本为产生羟自由基，即样本管吸光度大于对照管吸光度，底物工作液的配制方法如下：

按试剂 B底物储备液：纯水=1：299配制，用多少配多少；

3. 试剂C1工作液配制：按试剂C1：纯水=1：9配制；

4. 试剂C工作液配制：按试剂C1工作液：试剂C2=1：1配制；用多少配多少；剩余的2-8℃；

5． 试剂D工作液的配制：

用时将试剂D加纯水稀释至100ml即可，2-8℃保存；若有结晶，则37℃水浴至完全溶解后在加纯水稀释；

6. 显色剂的配制：试剂D工作液：试剂E:试剂F：冰乙酸=8:3:3:2，用多少配多少。

注：1.抑制羟自由基的物质：血清（浆）、各种组织匀浆液等；

2.产生羟自由基的物质：中性白细胞、某些药物、部分植物等。

（三）、计算公式：

血清（浆）中抑制羟自由基能力的计算：

1. 定义：

每ml血清（浆）在37℃反应1min，使体系中H2O2浓度降低1mmol/L为

1个抑制羟自由基能力单位；

2. 计算公式：

抑制羟自由基能力 = （对照OD值-样本OD值）/（标准OD值-空白OD值）

（U/ml） X 标准品浓度（8.824mmol/L）X (1ml/取样量) X

样本测试前的稀释倍数

组织样本中抑制羟自由基能力的计算：

1. 定义：

每mg组织蛋白在37℃反应1min，使体系中H2O2浓度降低1mmol/L为

1个抑制羟自由基能力单位；

2. 计算公式：

抑制羟自由基能力 = （对照OD值-样本OD值）/（标准OD值-空白OD值）

（U/mgprot） X 标准品浓度（8.824mmol/L）÷{待测样本蛋白浓度（mgprot/ml）X 取样量（0.2ml）}

溶血液样本中抑制羟自由基能力的计算：

1. 定义：

每mg血红蛋白在37℃反应1min，使体系中H2O2浓度降低1mmol/L为

1个抑制羟自由基能力单位；

2. 计算公式：

抑制羟自由基能力 = （对照OD值-样本OD值）/（标准OD值-空白OD值）

（U/mgHb） X 标准品浓度（8.824mmol/L）X (1ml/取样量) X

样本测试前的稀释倍数÷血红蛋白浓度（mgHb/ml）

产生羟自由基能力的计算公式：

1. 定义：

每ml或每mg物质或每立方厘米内106个细胞在本反应体系中使体系中H2O2浓

度增加1mmol/L为1个产生羟自由基能力单位；

2. 计算公式：

产生羟自由基能力 = （样本OD值-对照OD值）/（标准OD值-空白OD值）

（U/ml） X 标准品浓度（8.824mmol/L）X (1ml/取样量) X

样本测试前的稀释倍数

【注】： 必须每一只管子单独做；

反应时间精确在1min。

特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！