冰冻切片过氧化氢（H2O2）检测试剂盒

产品概述

过氧化氢（H2O2，Hydrogen peroxide）是体内的一种活性氧(Reactive oxygen species, ROS) 状态，参与细胞生长增殖、发育分化、衰老和凋亡以及许多生理和病理过程。 过氧化氢检测试剂盒是利用过氧化氢特异性荧光探针过氧化氢探针O32检测过氧化氢的试剂盒。过氧化氢探针O32是合成的苯蒽类荧光探针，可以自由穿过细胞膜，进入细胞内后，与细胞内过氧化氢反应，被氧化生成绿色荧光物质，绿色荧光强度与细胞内过氧化氢水平成正比，检测绿色荧光就可以知道细胞内过氧化氢的变化情况。 O32过氧化氢荧光探针具有极高的H2O2反应特异性，与其它类型的活性氧反应较少。 在激发波长488 nm，发射波长526 nm附近，使用荧光显微镜、激光共聚焦显微镜等检测绿色荧光，从而测定细胞内过氧化氢水平。 可以提供细胞凋亡、增殖、毒性、活性氧、细胞代谢、氧化应激、细胞膜流动性、膜通透性转换孔、细胞耗氧率、细胞内pH、细胞粘附、细胞自噬等数百种检测试剂盒产品。 可以为您提供各种颜色的M系列、N系列、L系列、E系列、G系列等细胞膜、细胞质、细胞核、溶酶体、线粒体、内质网、高尔基体、骨架、微管等细胞、细胞亚结构荧光染色试剂盒产品，以及钙离子、钠离子、氩离子等各种荧光染色试剂盒产品。 可以提供动物、植物、微生物、酵母、水产、家禽、兽类、土壤等样本的各种生化指标检测的数百种试剂盒产品。

保存温度

-20℃ 避光

注意事项

1.避免反复冻融。

2.可以根据需要分装后冻存。

3.探针为DMSO溶液，在2-8℃时是固体状态，冬季气温较低时为凝固状态，极易粘附在管壁、吸头壁。注意需要加热融解，从冰箱取出后恢复至室温或37℃短时间水浴，变成液体状态后离心至管底部再开盖。

有效期

6个月

检测方法

激光共聚焦显微镜/荧光显微镜

适用样本

1.新鲜冰冻切片 2.振动切片

3.石蜡切片

产品特点

1.使用方便：可用荧光显微镜直接拍照分析；

2.背景低，灵敏度高；

3.线性范围宽，使用方便。

仪器准备

1.激光共聚焦显微镜或荧光显微镜，

2.离心机

3.移液器

4.冰箱

5.冰盒

试剂准备

PBS缓冲液或者HBSS

耗材准备

1.离心管

2.吸头

3.玻片

4.一次性手套

使用注意事项

1.螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体收集至管底，避免开盖时液体洒落。

2.尽量缩短探针标记后到测定所用的时间，以减少各种可能的误差。

3.对于某些样本，如果荧光太强，可以按照1:200-1:1000稀释探针。探针标记的时间也可以根据情况在20-60分钟内适当进行调整。

4.尽量缩短探针标记后到测定所用的时间，以减少各种可能的误差。

5.过氧化氢O32探针在光照和空气中易被氧化，注意避光密封保存。

6.O32染色工作液必须现配现用，并且在当天用完。

7.O32对湿度非常敏感，若是O32溶液每次取完需要量后，必须紧紧密封盖子。建议根据单次用量，分装密封保存。不可使用含水的吸头。

8.对不同的组织，应选择合适的孵育时间和浓度，以观察过氧化氢的变化，很多细胞内的过氧化氢绝dui水平较低，需要根据实际情况适当延长孵育时间。

9.过氧化氢O32探针可以根据需要的用量分装后冻存，避免反复冻融。

10.过氧化氢O32探针不可以一次性全部稀释后长期保存不用，稀释后稳定性变差，有效期缩短。

11.以下操作步骤仅供参考，请根据实际样本情况调整。

使用方法

一、 试剂配制

1. 根据样本数，用纯水将O32过氧化氢荧光探针200倍稀释，配成染色工作液。

2. 用纯水将10X清洗液10倍稀释，配成1X清洗液工作液。

二、 探针标记

1. 准备待测的厚为10 μm的未经固定处理的冰冻切片。

2. 室温下，小心加上200 μl清洗液工作液，铺满整个切片表面，静置5-10分钟。

3. 小心吸除清洗液。

4. 滴加100 μl染色工作液，在37℃培养箱避光孵育20-60分钟。

5. 移除染色液。

6. 用PBS洗涤切片2-3次。

7. 加盖玻片或甘油封片。

8. 荧光显微镜检测。

特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！