一氧化氮检测试剂盒

产品概述

一氧化氮(Nitric Oxide，NO)，是一种非常重要的生理性的细胞内及细胞间的信号分子，在免疫、神经及循环等系统中起着重要作用。一氧化氮化学性质活泼，体内代谢转化为硝酸盐（NO3-）和亚硝酸盐（NO2-）,此两种浓度之和（NO3-＋NO2-）才能准确代表NO水平。 一氧化氮检测试剂盒利用硝酸还原酶特异性将NO3-还原为NO2-，通过显色反应测定其浓度的高低。 本试剂盒测试灵敏度高、简便、稳定，可用于血清、组织匀浆、细胞及细胞培养液、腹水、胸水、脑脊液、胃液、尿液等样本的NO浓度测定。 可以提供细胞凋亡、增殖、毒性、活性氧、细胞代谢、氧化应激、细胞膜流动性、膜通透性转换孔、细胞耗氧率、细胞内pH、细胞粘附、细胞自噬等数百种检测试剂盒产品。

保存温度

2-8℃ 避光

注意事项

1.开盖后组份按要求条件保存。

2.拆封后请尽快使用完！

有效期

3个月

检测方法

分光光度计

适用样本

血清、血浆、尿液、细胞培养上清、细胞裂解液、组织裂解液

仪器准备

1.分光光度计

2.恒温水浴锅

3.离心机

4.移液器

5.冰箱

6.冰盒

试剂准备

纯水

耗材准备

1.离心管

2.吸头

3.一次性手套

使用注意事项

1.因组织中NO含量较少，组织匀浆一般为10%或20%，且做好的组织匀浆离心速度为2500rpm/min，离心10分钟，转速不可过高，时间不可太长，样本取样量以0.3-0.5ml为宜。

2.试剂A、试剂B和标准品避免反复冻融，如果需要分多次实验，可以在第yi次实验时将试剂A和试剂B、标准品分装后再保存，根据每次实验时的试剂用量取出使用。

3.配好的显色剂避光保存。

4.血清、血浆、组织等样本应新鲜，或者于-80℃以下保存半年以内检测。

5.所有实验用水均需使用不含NO2-的纯水或双蒸水。

6.样本与底物反应完毕后，离心，取上清时千万不可将沉淀吸出，否者影响结果。

7.需使用一次性塑料试管，若没有，使用较新的玻璃管并彻底洗刷干净。

使用方法

试剂配制

1. 混合试剂的配制：

按试剂 A：试剂 B=1：1配制，用多少配多少，配好后充分混合后待用，现用现配，24小时内有效。

试剂 A，试剂 B使用前请放37℃水浴或室温使其溶解后混匀再用。

2. 试剂E工作液配制：

将试剂E加入90～100℃热双蒸水20 mL中，隔水加热充分溶解；4℃避光保存。

3. 试剂F工作液配制：

使用前将试剂F加入双蒸水8 mL中溶解后备用；4℃避光保存（如颜色变为深咖啡色不可再用）。

4. 显色剂配制：

使用前配制，用多少配多少。试剂 E工作液︰试剂 F工作液︰试剂 G＝2.5︰1︰1。若能在一个月内用完者也可一次配成。剩余显色剂避光保存。室温较低时会有结晶析出，再次使用时，放100℃水浴，反复摇动溶解后使用。

5. 100μmoL/L标准工作液配制：

取0.1 mL标准品（10mmoL/L）用双蒸水定容稀释至10mL（即100倍稀释），混匀，即为100μmol/L标准应用液。现配现用。

样本处理

1. 血清、血浆等液体样本：直接测定

2. 组织：

按照组织质量（g）：提取液体积(ml) =1：5-10 的比例（建议称取约0.1g 组织，加入1ml PBS或生理盐水（10%匀浆）进行冰浴匀浆，然后3000g ，4℃离心10分钟，取上清液待测。

1. 计算公式：

血清、血浆中NO含量计算：

NO含量 = 测定管吸光度值-空白管吸光度值 X 标准品浓度 X 样品测试前

（umol/L） 标准管吸光度值-空白管吸光度值 （100umol/L） 稀释倍数

2. 计算举例：

测人血清中NO含量，取人血清100μl进行检测，结果如下，测得空白管吸光度为0.080，标准管吸光度为0.169，测定管吸光度为0.109。血清未稀释，则稀释倍数为1，将数据带入计算公式：

NO含量（umol/L）=（0.109-0.080）/（0.169-0.080）*100umol/L*1=32.584umol/L

特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！