蛋白透析自动化缓冲液置换解决方案-Scienova透析板

蛋白透析自动化缓冲液置换解决方案-Scienova透析板

生物制药是目前最成功的一类药物，其中治疗性蛋白质和抗体具有明显优势。由于分子的复杂性，深入表征是非常重要的。通常纯化后需要进行蛋白质交换，以稳定蛋白质或创造适合进一步加工的条件。

Scienova和Hamilton合作，在Hamilton的Microlab STAR平台上自动化Scienova的Xpress Dialyzer平板，以克服治疗蛋白质量控制整个工作流程自动化的瓶颈。

图一

蛋白透析整个过程重要的是不能在缓冲液交换室中损失太多蛋白质。RC再生纤维素膜的使用大大减少了蛋白质与膜的结合。然而，在移液过程中蛋白质的损失也很重要。因此，将不同体积的含有对硝基苯酚的测试溶液填充到不同Xpress Dialyzer板的空腔中（图2）预润湿膜。

                  图2                               图3

如图3所示，用尖端（从顶部）对Xpress透析器板的空腔进行填充和排空。所得对硝基苯酚的量在吸光度读数器中进行定量。回收率（即使在低容量的情况下）始终高于或等于75%；在更高的体积下，甚至超过90%，如图4所示。

                                         图4

实现显著的蛋白质交换所需的时间对于纯化开发策略很重要，以便使蛋白质尽可能快的回到蛋白质稳定的条件下。

机器人通过Xpress Dialyzer板ED300的顶部入口用PBS Buer填充深井板，然后将含有对硝基苯酚的BSA溶液转移到透析室中，如前所示。

从深井板和透析室中取出样品，以观察对硝基苯酚在两个透析室之间的偏差。平衡透析实验在室温下用具有不同切口的板进行，以观察其对所需时间的影响。

                                        图5

如图5所示，板型在~4h后都达到了平衡；为了优化整个bu-er交换速率，在2h后就可以实现首次bu-er的交换。机器人通过Xpress Dialyzer板ED300的顶部入口用PBS填充深井板，然后将含有对硝基苯酚的BSA溶液转移到透析室中。

实现显著的蛋白质交换所需的时间对于纯化开发策略很重要，以便使蛋白质尽可能快的回到稳定条件下。

从深井板和透析室中取出样品，以观察对硝基苯酚在两个透析室之间的偏差。平衡透析实验在室温下用具有不同切口的板进行，以观察其对所需时间的影响。

Scienova Xpress Dialyzer极板是实现自动数据交换过程的理想工具，蛋白质纯化过程中。这些盘子可以很容易地装满，用Hamilton的Microlab STAR清空，即使透析过程中需要冷却环境。