Western blot底物发光检测试剂可由标记于二抗上的辣根过氧化酶催化,产生化学发光反应,可以灵敏地检测出目的蛋白的存在。
Absin ECL底物化学发光检测试剂盒基于新一代增强型化学发光底物研制而成,由辣根过氧化物酶(HRP)催化发生化学反应,发出荧光,可对X光胶片曝光,也可直接进行luminometer检测或者荧光CCD扫描。产品背景更低,稳定性更好。
试剂盒组分:A液;B液
操作步骤:
1. 按常规Western blot操作,二抗孵育后,进行最后一次洗涤时,根据膜的大小,按每10 cm2 膜混合0.5ml溶液A和0.5ml溶液B混匀,配制成发光检测工作液。
2. 用平头镊子将膜取出,膜的下缘轻轻接触吸水纸,以去除膜上多余的液体。膜的蛋白面朝上,置于洁净保鲜膜(某些市售保鲜膜包裹印迹膜时可能会淬灭荧光,应选择高质量保鲜膜)上。用吸管将配制的发光检测液转移到蛋白膜上,使其均匀覆盖,室温孵育2分钟。
3. 用平头镊夹持蛋白膜,膜的下缘轻轻接触吸水纸,以去除膜上多余的液体。膜的蛋白面朝上,包裹于洁净保鲜膜内。轻轻赶出其间的气泡,固定在X片暗盒内。
4. 在暗室中取一张X片置于包裹的膜上,合上暗盒,曝光30秒至1分钟。立即显影定影,根据其曝光强度,缩短或延长下一张X片的曝光时间(对微弱信号,曝光时间可延长至数小时)。
注意事项:
1. ECL A液和B液在吸取过程中必须要更换枪头,A液和B液相互污染后会导致 A液或B液逐渐失效,影响后续的使用效果。
2. 各溶液使用后,请盖紧瓶盖,以防失效。特别是B液,含有氧化剂,比较容易 被还原而失效。
3. ECL的荧光持续时间很长,但开始反应后的30分钟内荧光更强一些,随后荧光会逐渐减弱,因此请注意充分利用这荧光较强的30分钟进行压片。
4. ECL A液和B液均对人体有害,操作时请注意适当防护。为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操1作。
部分客户文章 (已收录引用文献近40篇)
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* Subchronic exposure to fluoride and arsenite induces oxidative stress and activates the Nrf2 signaling pathway in the kidneys of rat offspring
* Downregulation of G2/mitotic-specific cyclinB1 triggers autophagy via AMPK-ULK1-dependent signal pathway in nasopharyngeal carcinoma cells
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* MAPK信号通路在高糖高脂诱导的心肌细胞肥大中的差异调节作用
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ECL化学发光检测试剂盒产品订购信息:
货号 | 品名 | 规格 | 目录价 |
abs920 | ECL化学发光检测试剂盒 | 2*25ml | 210 |
abs920 | ECL化学发光检测试剂盒 | 2*50ml | 368 |
abs920 | ECL化学发光检测试剂盒 | 2*250ml | 1155 |
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