CellTimer-Light 细胞活力检测试剂盒

CellTimer-Light 细胞活力检测试剂盒

订购信息

产品描述

CellTimer-Light 细胞活力检测试剂盒（简称CT-Li）是以细胞内的ATP含量会在细胞凋亡和坏死时迅速下降，ATP的含量与细胞活力或数目成正比为依据，研发的一款利用化学发光方法测定ATP依赖的荧光素酶（Luciferase）借助ATP催化荧光素（D-Luciferin）发光的强度（图1），发光强度与ATP含量成正比，从而间接检测细胞的活力和数目的试剂盒。

本试剂盒光信号强且稳定持续，半衰期经检测可达 3.5 h以上（具体与细胞种类、数量及反应温度有关）；一步操作即可，检测速度快，10 min即可获得实验结果；拥有超高的信噪比和灵敏度，超宽的线性范围。适用于高通量筛选、生长曲线测定、小分子及大分子化合物细胞毒性检测。

图 1. CellTimer-Light 细胞活力检测试剂盒原理

运输与保存

蓝冰运输。4℃保存，有效期1个月；分装后-20℃保存，有效期24个月。

使用方法

1.首先将CT-Li 试剂平衡至室温待用，可使用常温水浴。

2.在不透明多孔板中培养定量的细胞，96孔板中培养液体积为100μl，384孔板为25μl，并设置不含细胞空白对照组和对照组。

3.实验组加入待检测物，孵育时间取决于具体实验。

4.从培养箱中取出培养板室温平衡约20分钟。

5.加入等体积CellTimer-Light试剂， 室温放置 10分钟，待发光信号稳定。

6.读取化学发光值，据此直接计算细胞的相对活力，或根据ATP标准曲线计算出ATP的量从而测定出细胞的活力。由于不同种类的细胞及不同密度的细胞的ATP代谢情况具有差异，细胞数量或活力和ATP含量在不合适的条件下可能会不呈现线性关系，所以推荐您在正式实验前用待测细胞生成ATP线性标准曲线，便于确定待测样品的CT-Li检测结果能通过线性关系计算出ATP的量，从而计算出细胞的活力。ATP标准品最高浓度建议可设置为 5μM，最低可设置在 10nM，培养基为空白对照，利用倍比稀释法，寻找合适的ATP稀释度，制成良好的ATP线性标准曲线。

注意事项

1.可根据实验需求分装配制好的 CT-Li 试剂，容器需保证无 ATP 污染，冻存于-20℃。反复冻融会导致试剂性能下降，但经测试 5 次冻融无明显影响。

2.不可以使用侧壁透明的多孔板，会导致孔间信号互相干扰（crosstalk），为尽可能全地收集光信号，推荐使用白色不透明多孔板进行检测。

3.由于发光信号强度受温度影响，检测生长曲线时，由于实验周期较长，建议严格控制温度，并尽可能使用同一批次试剂以获得最佳的平行性。

4.仪器检测模式为发光，而非光吸收和荧光，检测前请确认仪器功能。

5.本产品仅限科学研究使用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品和药品，不得存放于普通住宅内。

特别提示：本公司的所有产品仅用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！