MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒
产品简介
1. MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒(MTT Cell Proliferation and Cytotoxicity Assay Kit)被广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的实验方法。由于细胞活力与细胞数呈正相关,因此常常用来检测细胞的增殖情况。MTT可以被线粒体内的一些脱氢酶还原生成结晶状的深紫色产物formazan。在特定溶剂存在的情况下,可以被完全溶解。然后通过酶标仪可以测定570nm波长附近的吸光度。细胞增殖越多越快,则吸光度越高;细胞毒性越大,则吸光度越低。
2. 本试剂盒采用了独特的Formazan溶解液配方,无需去除原有的培养液,可以直接加入Formazan溶解液溶解formazan。从而避免了由于去除培养液时formazan被部分去除而引起的误差。
3. 本试剂盒背景低,灵敏度高,线性范围宽,使用方便提高了可靠性。
4. 本产品为100 次(5个96孔细胞培养板)操作。
使用说明:
1. 收集对数期细胞,调整细胞悬液浓度,每孔加入100ul铺板使待测细胞调密度至1000-10000孔,(边缘孔用无菌PBS填充)。
2. 5%CO2,37℃孵育,至细胞单层铺满孔底(96孔平底板,具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等决定)。加入浓度梯度的药物,原则上,细胞贴壁后即可加药,或两小时,或半天时间,每孔0-10ul,设3-5个复孔.建议设5个。
3. 5%CO2,37℃孵育16-48小时,倒置显微镜下观察。
4. 每孔加入10微升MTT染色液,继续培养4h。若药物与MTT能够反应,可先离心后弃去培养液,小心用PBS冲2-3遍后,再加入含MTT的培养液。
5. 每孔加入100微升Formanzan溶解液,置摇床上低速振荡10-30min,使结晶物充分溶解(如果仍有部分formazan未溶解,建议用移液器反复轻轻吹打2-3次避免产生气泡或过夜孵育溶解)。在酶联免疫检测仪570nm测定吸光度。如无570nm滤光片,可以使用560-600nm的滤光片。
6. 同时设置调零孔(培养基、MTT染色液、Formanzan溶解液),对照孔(细胞、相同浓度的药物溶解介质、培养液、MTT染色液、Formanzan溶解液)
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特别提示:本公司的所有产品仅用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
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