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Taq DNA聚合酶,5U/uL
Taq DNA Polymerase
本品是从克隆有Thermu aquaticus DNA Polymerase基因的大肠杆菌经诱导表达后分离纯化的,其分子量为94 KD。具有5’-3’DNA聚合酶活性和5’-3’外切核酸酶活性,无3’-5’外切酶活性。在PCR反应中,Taq DNA Polymerase延伸速度为1-2 kb/分钟,产物3’端带A,可直接用TA载体克隆。一般用于DNA片段的PCR扩增、DNA标记、引物延伸、序列测定、平末端加A等,产物可以直接用于T/A载体克隆。本品浓度为5 U/μl。
活性定义:1单位(U) Taq DNA Polymerase活力定义为在74℃、30分钟内,以活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物,将10 nmol脱氧核苷酸掺入到酸不溶物质所需的酶量。
10×Taq Buffer:200 mM Tris-HCl (pH 8.4);200 mMKCl;15 mMMgCl2; 其它成分。
贮存溶液:20 mM Tris-HCl (pH 8.0);0.1 mMEDTA;1 mMDTT;100 mMKCl ; Stabilizers; 50% glycerol
反应举例:
注意:以下举例为常规PCR反应系统,仅供参考。实际反应条件因模板、引物等的结构不同而各异,需根据模板、目的片段的大小、碱基序列和引物长短等具体情况,设定最佳反应条件。
以人基因组DNA为模板,扩增1 kb的片段
1、反应体系的建立:50 ml反应体系如下(可根据比例放大或缩小反应体系):
Template | <1μg |
Primer 1(10μM) | 1μl |
Primer 2(10μM) | 1μl |
10×Taq Buffer | 5μl |
dNTP Mixture(10mM) | 1μl |
Taq (5 U/μl) | 0.5μl |
ddH2O | 补至 50μl |
2、PCR反应循环的设置:
94℃ 3min
94℃ 30sec
55℃ 30sec 30cycles
72℃ 1min
72℃ 5min
3、结果检测:反应结束后取5 ml反应产物,琼脂糖凝胶电泳检测。
储存条件:-20℃,有效期一年。
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
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