DOP-PCR试剂盒
Degenerate Oligonucleotide Primer PCR Kit
DOP-PCR即简并寡聚核苷酸引物PCR,是扩增全基因组的方法之一,它利用中间含有6个随机碱基的22nt引物,通过两轮PCR(第一轮低温复性,第二轮高温复性)而将模板DNA扩增。DOP-PCR扩完整基因组的效率不如利用phi 29 DNA聚合酶的MDA,但在扩增高度降解的痕量DNA 方面具有巨大优势,在法医鉴定领域具有重要应用。本产品就是在DOP-PCR基础上进行优化而开发。
产品特点:
1. 专门用于高度降解的DNA,方便,含有除模板DNA和引物以外的所有成份,简化了准备工作。
2. 优化的引物浓度,使自连序列和非模板相关序列的合成。
3. 使用高保真酶,降低突变率。
4. 长度在300-1700bp 之间,平均500bp左右。
5. 模板基因DNA 用量一般为10-100pg。
6. 所得PCR产物可用于STR 多重扩增、比较基因组杂交、单染色体文库构建、基因组图谱研究等。
试剂盒组成:
成分 | 规格 |
DOP-PCR Magic Mix | 750μl |
DOP-PCR引物(20pmol/μL) | 250μL |
超纯水 | 1ml |
说明书 | 1份 |
储存条件:低温运输、-20℃保存,保存期限为12个月。不要反复冻融。
使用方法:
1.在一干净的PCR 管中,加入下列成分:
成分 | 阴性对照 | 样品 |
DOP-PCR MagicMix | 25μL | 25μL |
基因组DNA模板(自备)或单个细胞 | 不加 | 10-100pg(或一个单个细胞) |
DOP-PCR引物(20 pmol/μL) | 5μl | 5μl |
补水到 | 50μl | 50μl |
2. 放入PCR仪中按下列参数进行DOP-PCR。
预变性 | 95℃ | 5min |
第一轮PCR(12个循环) | 94℃ | 1min |
30℃ | 1.5min |
72℃(30℃升到72℃的时间设定为3分钟) | 3min |
第二轮PCR(35个循环) | 94℃ | 1min |
62℃ | 1min |
72℃(每次循环后此步的保温时间延长14秒) | 2min |
延伸 | 72℃ | 7min |
| 4℃ | Forever |
3.结束后取5-10μl直接上样电泳(不需要额外再加DNA上样液),红色染料电泳速度相当于50bp DNA片段。DOP-PCR产物的长度一般在300-1700bp之间。
4. 所得DOP-PCR产物可以用于后续PCR检测或其他分析。
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
DOP-PCR试剂盒信息由上海泽叶生物科技有限公司为您提供,如您想了解更多关于DOP-PCR试剂盒报价、型号、参数等信息,欢迎来电或留言咨询。除供应DOP-PCR试剂盒外,上海泽叶生物科技有限公司还可为您提供血液专用2XPCR Mix,(2X PCR MagicMix for Blood)、miRNA荧光定量RT-PCR检测试剂盒、PCR污染清除剂等产品,公司有专业的客户服务团队,是您值得信赖的合作伙伴。