真菌总蛋白质微量提取试剂盒
Fungal Total Protein Miniprep Kit
本产品专门用于快速提取微量酵母蛋白用于SDS-PAGE凝胶电泳和Western印迹分析。本产品结合玻璃珠破壁和化学法破壁两种方法,适合于各种形态的各种酵母材料。
产品特点:
1.破壁效率高,能达到80-90%。
2.可以处理各种酵母样品。
3.操作简单,得到的裂解液可以直接用于SDS-PAGE和Western印迹分析。
试剂盒组成:
成分 | 规格 |
溶液A | 100ml |
溶液B成分一 | 50ml |
溶液B成分二 | 1.5g |
玻璃珠,400μm | 5g |
说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输、4℃保存(溶液B成分二需-20℃保存),有效期一年。
使用方法:
准备工作:将溶液B成分二(干粉)全部加到50mL溶液B成分一中,充分摇晃使之全部溶解,成为溶液B,然后分装成小分(体积根据每次实验的样品数决定)并放-20℃长期保存。
1.将酵母细胞接种到5mL YPD培养基中,30℃摇晃(250rpm/分钟)过夜培养使其OD600达到0.5~2.0。
2.把酵母细胞培养物转到装有2mL预冷溶液A的10-15mL离心管中,混匀。
3.4℃,5000g离心5分钟沉淀酵母细胞,吸出上清液。
4.用30μL溶液B悬浮酵母细胞,并快速转移到1.5mL塑料离心管中。
5.100℃下保温3分钟,使蛋白酶失活,样品存放于-20℃。
6.加入0.1g的玻璃珠。
7.在旋涡振荡器上剧烈振荡混合2-10分钟。
8.加入70μl溶液B,稍加振荡,置100℃保温1分钟。
9.取5-20μl抽提液上样直接进行SDS-PAGE凝胶电泳。
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
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