大肠杆菌BL21 Star(DE3)化学感受态细胞
E.coli BL21 Star(DE3) Chemical Competent Cell
BL21 Star(DE3)感受态细胞来源于BL21(DE3)菌株,由特殊工艺制作,使用pUC19质粒检测本产品,转化效率可达10cfu/μg。
?BL21 Star(DE3)菌株的特点是含有rne131基因突变体。rne131突变基因能够增强菌株细胞内mRNA的稳定性,从而有效提高蛋白表达能力。本产品主要适用于T7启动子表达载体(如pET 系列)的高水平蛋白表达。
?菌株基因型为:F-ompT hsdSB(rB-mB-)gal dcm rne131(DE3)。
储存条件:干冰运输、-80℃保存,有效期半年。
自备试剂:目的DNA、LB培养基等。
使用方法:
1.从-80℃冰箱中取出感受态细胞,置于冰上解冻。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μL,可以根据实际情况分装使用。以下实验以100μL感受态细胞为例。
2. 取 100μL冰上融化的BL21 Star(DE3)感受态细胞,加入目的质粒并轻轻混匀,冰上静置25分钟。
3. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。
4. 向离心管中加入700μL不含抗生素的无菌培养基(LB),混匀后37℃,200rpm 复苏60分钟。
5. 取100μL左右菌液涂布于含相应抗生素的LB培养基上。如果转化高浓度的质粒,可以减少涂布的量。
6. 将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
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