柱式粪便DNA提取试剂盒（柱式粪便DNAout）

柱式粪便DNA提取试剂盒（柱式粪便DNAout）

Stool DNA column extraction kit

本试剂盒是动物粪便DNA提取试剂盒的柱式升级产品，专门用于从各种动物粪便中快速提取高质量的DNA。

产品特点：
1. 操作更加简单快速，一个样品只需要十多分钟的时间。
2. DNA 更加纯净，OD260/280一般都在1.8以上，得到的DNA样品原液或稀释液可以直接用于PCR扩增。
3. 每次微量提取可以处理100-300mg左右的样品，能得到5μg左右DNA，片段长度在30 Kb左右。
4.可以同时提取到肠道上皮细胞和可能的肠道病原菌的DNA。
5. 试剂无毒无害，环保。

试剂盒组成：

储存条件：常温运输及保存，有效期一年。

使用方法：
1. 65℃预热溶液A，待其沉淀溶化后充分混匀，取0.5mL加入到1.5mL塑料离心管中并放置于65℃待用。
2. 称取 0.1-0.3 g的粪便，加入到含预热溶液A的离心管中，震荡器上剧烈震荡5-10分钟。如果是扩量操作，可以使用更多粪便和较大离心管。也可以将同一种粪便在较大离心管中震荡处理，然后再分到1.5mL离心管中。注意:不论使用大的还是小的离心管，一定要让管底的粪便震荡起来。
3. 将离心管置于65℃水浴中保温至少5分钟。
4. 12000～15000g室温离心3分钟，将上清转移到一新离心管中(上清液一般呈淡黄色或深棕色，实际颜色随样品而异，上清液的体积一般为300-400μL)。
5.在上清液中加入等体积的溶液B，上下颠倒30秒充分混匀，溶液将呈白色或淡黄色混浊状。
6. 将离心管冰浴至少5分钟。
7. 12000～15000g室温离心3分钟，转移上清到新的1.5mL离心管中，上清液颜色将比第4 步得到的上清的颜色稍淡，体积在0.7mL左右。
?注意：下面第8-第9 步的氯仿抽提操作可以省略，直接进入第10 步，但DNA的产量会低50%左右，OD260/280在1.7-1.8。如果直接进入第10 步，则转移的溶液体积不要超过0.6mL，否则没有空间加溶液C。
8. 加入0.2mL的氯仿(自备)，震荡器上充分振荡30秒混匀。注意:一定要让管底的溶液震荡起来。
9. 12000～15000g室温离心3分钟，小心转移上清到新离心管中。说明：离心后两相交界面将有白色膜状物，其中有机相部分颜色较深，一般呈淡棕色。将上清转移到新的1.5mL离心管时，不要超过0.6mL，否则没有空间加溶液C。如果有多余的可以弃之不用。
10. 加入1.5倍体积的溶液C，上下颠倒30秒混匀。
11. 分两次上柱(即先转移一半的混合液到离心吸附柱中，12000～15000g室温离心半分钟，弃穿透液，然后再将剩下的混合液到离心吸附柱中，12000～15000g室温离心半分钟，弃穿透液)。
12. 加 0.7mL 通用洗柱液到离心吸附柱中，12000～15000g室温离心半分钟，弃穿透液。
13. 如果有必要，可以再加0.3mL 通用洗柱液到离心吸附柱中，12000～15000g室温离心半分钟，弃穿透液。增加一步洗涤能使最后得到的DNA的纯度稍有提高，但产量稍微有所降低。
14. 12000～15000g室温再离心半分钟。此步十分重要，否则残留的通用洗柱液会污染DNA。
15. 将离心吸附柱转移到一新的1.5mL塑料离心管中，加入50-100μl DNA洗脱液2.0。
16.室温放置离心吸附柱1-2分钟。
17. 12000～15000g室温离心半分钟，离心管中溶液即为DNA样品，可以立即使用或存放于冰箱待用

特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！