TRIzol伴侣
TRIzol-Mate
产品及特点 TRIzol 是美国 Invitrogen 公司的、用于总 RNA 提取(主要是动物总RNA 提取)的著名产品,具有广大的客户群。但其缺点之一是一直没有柱式升级产品,客户仍然要使用既繁琐又费事的非柱式操作(另一缺点是不能用于富含多糖和多酚的材料)为解决此问题,我们特推出本产品,主要特点是:跟 TRIzol 结合使用,把经典操作变成了柱式操作,简化了实验流程,用户可以节约 30 分钟的时间。其他特点如下:
1. RNA 质量更好,因为操作简短减少了 RNA 在提取过程中的降解。
2. RNA 纯度更高,OD260/OD280 一般在 1.9 以上,比经典 TRIzol 法得到的更纯。
3. 专门的洗涤条件能有效去除基因组 DNA,进一步减少其对 RNA 的污染。
4. 适 用于 其 他基 于 酸酚 /异 硫氰 酸 胍提 取 原理 的 RNA提取产品,包括 TRIzol、TRIzol LS、TRI Reagent 等。
5. 可以省略氯仿处理步骤,避免接触有毒试剂储存条件:常温运输和保存、有效期两年。
运输及保存 常温运输和保存,有效期一年。 自备试剂 TRIzol 或 TRIzol 同类产品、氯仿
使用方法 一、免氯仿操作(此操作更快捷,不需要氯仿,但纯度稍低)
1. 按 TRIzol 的使用手册进行总 RNA 提取到加氯仿之前一步。
2. 将裂解物在 13000rpm 离心 2 分钟(最好 4℃离心,常温离心也可),沉淀是不能裂解的细胞碎片和结缔组织纤维。
3. 转移上清液(约 1mL)到至一个自备的 RNase-free 2 mL 塑料离心管中(注意,不是 1.5mL)。
4. 加入等体积的柱式动物 RNAout 溶液 B,颠倒混匀 30 秒。
5. 分次转移到离心吸附柱中,每次约 0.7mL。
6. 每次转移后,需要 13000-15000 g 室温离心半分钟,弃收集管中的穿透液。如果不能全部离心下去,可延长离心时间到 2 分钟。是否需要延长根据样品不同而不同。
7. 加 0.7 mL 通用洗柱液到离心吸附柱中,室温 13000rpm 离心半分钟,弃收集管中的穿透液。一次洗涤一般足够去除杂质。
8. 再用 0.3 mL 通用洗柱液重复上步一次。
9. 室温 13000rpm 干甩半分钟。此步对去除残留通用洗柱液十分重要,否则残留的通用洗柱液会影响 RNA 的质量和使用。
10. 将离心吸附柱转移到一自备的 RNase-free 1.5mL 离心管中,加入50-100 μL RNA 洗脱液。
11. 室温 13000rpm 离心半分钟,离心管中溶液即为 RNA 样品,可以立即使用或存放于-80℃待用。
二、 加氯仿操作(此操作需要氯仿,但纯度稍高)
12. 按 TRIzol 的使用手册进行总 RNA 提取加入氯仿离心后这一步。
13. 离心后,将上清转移到(约 0.7mL)到至一个自备的 RNase-free 1.5-2mL 塑料离心管中。
14. 后续操作同第 4-11 步。
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
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