小鼠肺成纤维细胞永生化
小鼠肺成纤维细胞永生化细胞介绍
成纤维细胞是肺间质中含量最丰富的细胞种类。这些成纤维细胞与普通的相似,但也有其特有的特征,例如具有很长的伪足和细胞间的间隙连接。肺成纤维细胞的主要功能为分泌肺泡隔基质中的III型胶原,弹性蛋白以及蛋白多糖,也在肺部受损时担任重要的修复和重建功能。肺部受伤后,在炎症部位的一定程度的成纤维细胞积聚是肺部复原的关键步骤,过多或者不足的成纤维细胞聚集都会导致肺功能异常。
该细胞通过慢病毒转染的方式携带SV40基因。
小鼠肺成纤维细胞永生化细胞特性
1) 组织来源于实验动物的正常肺组织。
2) 细胞鉴定:纤维连接蛋白(Fibronectin)或波形蛋白(Vimentin)免疫荧光染色为阳性。
3) 经鉴定细胞纯度高于90%。
4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
5) 细胞生长方式:长梭状细胞,贴壁培养。
英文名称:
传代方法:1:3~1:6传代
传代情况:P23
冻存条件:细胞冻存液
小鼠肺成纤维细胞永生化处理方法:
1. 细胞在培养瓶中培养至状态良好后灌满培养基运输,获得细胞后用酒精棉球擦拭瓶口消毒,然后在超净台中操作。
2. 如细胞生长至70%-80%,将瓶中的培养基移入无菌瓶中留作培养使用,保留5-8mL培养基在37℃、5%的CO2的温箱中继续培养。细胞培养至90%-100%后,按要求消化传代。
3. 弃去培养基,用无菌PBS或者其他缓冲液清洗细胞2次,加入适量胰蛋白酶消化(EDTA胰酶),待细胞完全脱壁后加培养基吹打混匀,分瓶培养。
特别注意:(如使用公共实验室或初次接触细胞培养,建议添加双抗培养)
1. 我们使用自产培养基及进口血清培养细胞,在您拿回细胞后,如想更换其它品牌培养基,请依照逐次替换的原则,先保留培养瓶中的培养基,多日多次代逐步更换,以减轻对细胞的刺激。
2. 如签收时出现培养瓶壁破裂,漏液等情况请及时拍照并联系售后。
3. 细胞任何售后问题,均需拍照存档并在2周之内及时联系客服。
实验中如何辨别细胞的污染?
细胞污染很多种,不bai同种细胞污染表现不du同,可能检测方法zhi不同。不过大部分污染用肉dao眼加镜检就可以解决。
细胞污染一般分细菌污染,真菌污染,支原体污染,黑胶虫等。
细菌污染:pH升高培养基变黄,培养基严重浑浊,镜下可见细菌游动;
真菌污染:培养液短期内多不浑浊,有肉眼可见漂浮物,镜下细胞间有菌丝体,生长变慢,时间长细胞死亡;
支原体污染:细胞生长一般无可见变化,可用支原体检测试剂盒检测支原体污染(现在市场上有卖,有检测支原体DNA的,灵敏度高但过程复杂;非检测DNA的过程简单)
黑胶虫:培养液不浑浊,细胞生长影响不大,镜下有小黑点做布朗运动;
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
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