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CORTECS“柱”力工业大麻安全分析 — 从合法种植到尿液/血样监控

YIFANG S&T

2020/10/20 11:54

阅读:100

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工业大麻,是一种获准合法种植的、低含毒量的大麻品种。有别于毒品大麻,主要在于其种属不同工业大麻的精神活性物质THC(四氢大麻酚)含量低于0.3%,并且全身都是宝:
■ CBD(大麻二酚,Cannabidiol):具有抗痉挛、抗焦虑、抗癌、抗抑郁等药理作用,是工业大麻的主要价值所在; 
■ 大麻籽油:可以用于化妆品、保健品;
■ 大麻纤维:抗菌、透气、防紫外,可用于纺织或作为增强材料。


如何分辨工业大麻VS毒品大麻,避免鱼目混珠?
01
HPLC方法
使用仪器及色谱柱:
  • Alliance HPLC系统/PDA检测器
  • CORTECS Shield RP18, 2.7 μm,4.6x150 mm (货号:186008685
26分钟/针,分离包括CBD与THC及其衍生物在内的16种组分,可供分析检查大麻花、叶及提取物的总THC、总CBD以及THC/CBD比值。

图1. 16种大麻相关组分


其中CBD是有经济价值的药效成分,在工业大麻中会表现为高含量存在。总HTC则包括D9-THC和HTC-A,这些是精神毒品成分,在毒品大麻中高含量存在!

例如,下面两张分析谱图,样品分别来自工业大麻的花和毒品大麻的花,你能看得出,哪个对经济有贡献、哪个需要严厉打击吗?

■  工业大麻的花,高CBD含量 — 这是有经济价值的药效成分。

图2. 工业大麻的花

■  毒品大麻的花,高THC含量 — 注意!D9-THC和THC-A,这些都是精神毒品成分!

图3.毒品大麻的花


02
UPLC方法


使用仪器及色谱柱:

  • ACQUITY UPLC H-Class系统/PDA检测器

  • CORTECS UPLC Shield RP18,1.6 μm,2.1x100 mm (货号:186008694

图4.  HPLC & UPLC 分析16种大麻组分对比图


除了THC类的天然大麻素,还有合成大麻素也为执法机构和司法鉴定实验室带来日益严峻的挑战。因为这些合成大麻素会对神经系统产生类似于天然大麻素的影响,所以也被非法使用。

如何检查潜在吸毒人员,从尿样到全血?
01
定量检测尿液中的合成大麻素


使用的仪器、色谱柱及样品制备:

  • ACQUITY UPLC I-Class,Xevo TQD

  • CORTECS C18 UPLC柱, 1.6 μm,2.1x100 mm货号:186007095

  • Oasis HLB μElution 96孔板(货号:186001828BA

  • 化合物校准曲线范围:1-100 ng/mL

可以在7.5 min内完成22种分析物的分析,总运行时间为8.5 min。所有峰的峰宽(5%峰高处)小于3秒。下图中的峰9和峰10是一对同分异构代谢物,其母离子与子离子都相同,依靠CORTECS UPLC柱得以分离(分离度为1.04),从而可实现分别准确定量。

图5. 尿液中22种合成大麻素及代谢物的UPLC/MS/MS图


实心核颗粒,拥有更高柱效。使用CORTECS UPLC色谱柱得到的峰宽,较相同规格的BEH C18和HSS T3 UPLC柱更窄,分别减少12%和23%,因此能够获得更好的分离效果,以确保准确定量。

图6. 比较相同规格CORTECS C18 UPLC柱和ACQUITY UPLC BEH C18柱,在相同的分析条件下,对峰5-10的分离效果

样品制备方法:
1) 向1 mL尿液中加入0.5 mL 0.8 M磷酸钾缓冲液(pH7.0);
2) 加入10 μL β-葡糖醛酸糖苷酶,在40度下温育1小时;
3) 加入1.5 mL 4%磷酸水溶液(即:尿液被稀释3倍);
4) 取600 μL(相当于200 μL尿液样品)加入Oasis HLB μElution板;
5) 依次用200 μL水、200 μL 50%甲醇水溶液清洗;
6) 用25 μL 60:40 乙腈/异丙醇洗脱2次至收集板(洗脱液合并);
7) 用75 μL水稀释收集板内样品溶液,盖上96孔密封垫,即可上样。

图7. 采用Oasis HLB μElution板从尿液中提取的合成大麻素化合物的回收率和基质效应,图中的条柱和误差条柱分别表示平均值和标准偏差(N=4)



02
定量检测全血中22种合成大麻素与代谢物


使用仪器及色谱柱:

  • ACQUITY UPLC,TQD

  • CORTECS C18 UPLC柱, 1.6 μm,2.1x100 mm(货号:186007095

  • Ostro 96孔样品制备板(货号:186005518

  • 化合物校准曲线范围:2-500 ng/mL

图8. 全血中22种合成大麻素及代谢物的UPLC/MS/MS谱图


样品制备方法:
1) 准备Ostro 96孔样品制备板,加入150 μL 0.1 M 硫酸锌/醋酸铵水溶液;
2) 加入50 μL全血;
3) 涡旋混合5秒使血细胞溶解;
4) 再加入600 μL乙腈;
5) 涡旋混合3 min,蛋白变性沉淀;
6) 施加正压或者负压,使样品流经Ostro 96孔板至96孔收集板,完成样品制备。

图9. 采用Ostro 96孔样品制备板从全血中提取合成大麻素化合物的回收率和基质效应,图中的条柱和误差条柱分别表示平均值和标准偏差(N=4)


上述方法中所涉及到的标准品与实验室耗材

天津一方均可提供

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400-185-8866

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