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当前位置: 上海莼试生 > 解决方案 > 白乐杰马杜拉放线菌染料法荧光定量PCR试剂盒基础技术理论

白乐杰马杜拉放线菌染料法荧光定量PCR试剂盒基础技术理论

2020/04/21 15:21

阅读:163

分享:
应用领域:
医疗/卫生
发布时间:
2020/04/21
检测样品:
其他
检测项目:
生化检验
浏览次数:
163
下载次数:
参考标准:
PCR试剂盒

方案摘要:

荧光定量PCR线性关系成立的条件分析 、荧光定量PCR线性关系成立的条件分析。 左图横坐标是PCR循环次数,纵坐标是总的荧光强度Rn,改图反映的是各个样品随着 左图横坐标是PCR循环次数,纵坐标是总的荧光强度Rn,改图反映的是各个样品随着 每轮PCR反应,其总的荧光量的实时变化;右图横坐标也是PCR循环次数,纵坐标是 每轮PCR反应,其总的荧光量的实时变化;右图横坐标也是PCR循环次数,纵坐标是 总的荧光强度与荧光本底的差值RT RB即△Rn的对数,在右图中确定阈值线,该直 总的荧光强度与荧光本底的差值RT –RB即△Rn的对数,在右图中确定阈值线,该直 线上所有样品的RT RB的对数都相同,荧光定量PCR的线性关系才会成立。 线上所有样品的RT –RB的对数都相同,荧光定量PCR的线性关系才会成立。

产品配置单:

所需试剂

寨卡(zika)病毒核酸试剂盒

型号: 48T

产地:

品牌: PCRmax

¥2499

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紫菀LAMP鉴定试剂盒

型号:

产地:

品牌: PCRmax

¥2499

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猪源性成分(Porcine)核酸试剂盒

型号: 48T

产地:

品牌: PCRmax

¥2499

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枳实LAMP鉴定试剂盒

型号:

产地:

品牌: PCRmax

¥2499

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紫苏子LAMP鉴定试剂盒

型号:

产地:

品牌: PCRmax

¥2499

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方案详情:

白乐杰马杜拉放线菌染料法荧光定量PCR试剂盒荧光定量PCR技术的基础理论:

1、荧光定量PCR线性关系成立的条件分析 、荧光定量PCR线性关系成立的条件分析。

左图横坐标是PCR循环次数,纵坐标是总的荧光强度Rn,改图反映的是各个样品随着 左图横坐标是PCR循环次数,纵坐标是总的荧光强度Rn,改图反映的是各个样品随着 每轮PCR反应,其总的荧光量的实时变化;右图横坐标也是PCR循环次数,纵坐标是 每轮PCR反应,其总的荧光量的实时变化;右图横坐标也是PCR循环次数,纵坐标是 总的荧光强度与荧光本底的差值RT RB即△Rn的对数,在右图中确定阈值线,该直 总的荧光强度与荧光本底的差值RT –RB即△Rn的对数,在右图中确定阈值线,该直 线上所有样品的RT RB的对数都相同,荧光定量PCR的线性关系才会成立。 线上所有样品的RT –RB的对数都相同,荧光定量PCR的线性关系才会成立。

QQ截图20191105160137.jpg

稀释 PCR 阳性对照(以 10E2-10E7 拷贝/μL 这 6 个 10 倍稀释度为例)

1. 注意:由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体样品做阳性对照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作为阳性对照。

2. 标记 6 个离心管,分别为 7,6,5,4,3,2。

3. 用带芯枪头分别加入 45 μL 荧光 PCR 专用模板稀释液(最好用带芯枪头,下同)。

4. 在 7 号管中加入 5 μL 1×10E8 拷贝/μL 的阳性对照,充分震荡 1 分钟,得1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。

5. 换枪头,在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。

6. 换枪头,在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。

7. 重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的阳性对照。放冰上待用。


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