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寨卡病毒PCR检测试剂盒组成及试剂配制

2020/01/15 16:20

阅读：10

应用领域：

石油/化工

发布时间：

2020/01/15

检测样品：

其他

检测项目：

PCR试剂盒

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参考标准：

PCR试剂盒

方案摘要：

寨卡病毒PCR检测试剂盒组成及试剂配制: 1、费用酶标板：一块（96孔） 2、标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。 3、样品稀释液：1×20ml。 4、检测稀释液A：1×10ml。 5、检测稀释液B：1×10ml。需要自备的器材： 1．寨卡病毒PCR检测试剂盒费用仪器：分析天平、离心机、荧光 PCR 扩增仪、组织研磨器、-20 ℃冰箱、可调移液器（2 µL、20µL、200 µL、1000 µL）。 2．耗材：荧光 PCR 专用反应管、眼科剪、眼科镊、生理盐水、1.5 mL 经焦碳酸二乙酯（DEPC）水处理的灭菌离心管、吸头（10 µL、200 µL、1000 µL）、灭菌双蒸水。寨卡病毒PCR检测试剂盒费用具有下列特点： 1.即开即用，用户只需要提供样品 DNA 模板，操作简单，定量准确快速。 2. 引物经过优化，特异性强。预期的 PCR 产物长度为 560 bp。 3. PCR mix 中含上样染料，PCR 后可以直接上样电泳。 4. 提供阳性对照，便于分析试验结果。

产品配置单：

所需试剂

紫菀LAMP鉴定试剂盒

型号：

产地：

品牌： PCRmax

¥2499

参考报价

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枳实LAMP鉴定试剂盒

型号：

产地：

品牌： PCRmax

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紫苏子LAMP鉴定试剂盒

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型号：

产地：

品牌： PCRmax

¥2499

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方案详情：

寨卡病毒PCR检测试剂盒费用组成及试剂配制:

1、酶标板：一块（96孔）

2、标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。

3、样品稀释液：1×20ml。

4、检测稀释液A：1×10ml。

5、检测稀释液B：1×10ml。

使用及效果：

PCR反应特点

(1) 特异性强

PCR反应的特异性决定因素为：

①引物与模板DNA特异正确的结合；

②碱基配对原则；

③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性；

④靶基因的特异性与保守性。

需要自备的器材：

1．寨卡病毒PCR检测试剂盒费用仪器：分析天平、离心机、荧光 PCR 扩增仪、组织研磨器、-20 ℃冰箱、可调移液器（2 µL、20µL、200 µL、1000 µL）。

2．耗材：荧光 PCR 专用反应管、眼科剪、眼科镊、生理盐水、1.5 mL 经焦碳酸二乙酯（DEPC）水

处理的灭菌离心管、吸头（10 µL、200 µL、1000 µL）、灭菌双蒸水。

寨卡病毒PCR检测试剂盒费用具有下列特点：

1.即开即用，用户只需要提供样品 DNA 模板，操作简单，定量准确快速。

2. 引物经过优化，特异性强。预期的 PCR 产物长度为 560 bp。

3. PCR mix 中含上样染料，PCR 后可以直接上样电泳。

4. 提供阳性对照，便于分析试验结果。

其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性，使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行，结合的特异性大大增加，被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区，其特异性程度就更高。

(2) 灵敏度高

PCR产物的生成量是以指数方式增加的，能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞；在病毒的检测中，PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位)；在细菌学中zui小检出率为3个细菌。

(3) 简便、快速

PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶，一次性地将反应液加好后，即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应，一般在2～4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析，不一定要用同位素，无放射性污染、易推广。

(4) 对标本的纯度要求低

不需要分离病毒或细菌及培养细胞，DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技

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