细胞名称 小鼠胚胎成纤维细胞;STO
形态特性 成纤维细胞样
生长特性 贴壁生长
特征特性 STO是一株继代生长的胚成纤维细胞系,可用于制备饲养层细胞(feeder layers)和其他研究。
培养条件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10FBS
传代方法 1:3传代,2-3天传一代
传代情况 C4
冻存条件 基础培养基+5DMSO+20FBS
产品名称 | 小鼠胚胎成纤维细胞;STO价格 |
生长特性 | 贴壁生长 |
货号 | CS-X7314 |
细胞培养操作规程:
主要功能:
(1)血管平滑肌细胞的再生能力是原发血管病变的重要因素。
(2)表达钙通道及ICAM-1和VCAM-1,参与血管壁的炎症反应。
(3)与血管疾病的进展和稳定有关。
生理变化:
(1)主动脉硬化。
(2)主动脉瘤
(3)主动脉钙化。
一般培养方法:
1、组织块培养法
A)按照前述方法取材,将组织剪成或切成1mm3大小的小块,并加入少许培养基使组织湿润。
B)小鼠胚胎成纤维细胞;STO价格将小块均匀涂布于瓶壁,每小块间距0.2 cm~12.5px,一般在25mL培养瓶(底面积为437.5px2)可接种20~30小块为宜,小块放置后,轻轻翻转培养瓶,使瓶底朝上,然后于瓶内加入适量培养基盖好瓶塞,将瓶倾斜放置在37℃温箱内。
C)培养2~4小时,待小块贴附后,将培养瓶缓慢翻转平放,静置培养,动作要轻,严禁摇动和来回振荡,以防由于冲动而使小块漂起而造成培养失败,若组织块 不易贴壁可预先在瓶壁涂一薄层血清、胎汁或鼠尾胶原等。开始培养时培养基不宜多,以保持组织块湿润即可,培养24小时后再补液,培养初期移动和观察时要轻 拿轻放,开始几天尽量不去搬动,以利贴壁和生长,培养3~5天时可换液,一方面补充营养,一方面去除代谢产物和漂浮小块所产生的毒性作用。
2、消化培养法
该方法是采用前述的消化分散法,将妨碍细胞生长的细胞间质(包括基质、纤维等)去除,使细胞分散形成细胞悬液,然后分瓶培养。
3、悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞,如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化,可采用低速离心分离,直接培养,或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。
培养操作:
1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类;
1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。
2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。
3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取
Cdc14A 英文名称: 细胞周期调控因子14A抗体 0.1ml
Anti-PAR4 蛋白酶活化受体4抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml
RANA(Human rheumatoid arthritis associated nuclear artigen) ELISA Kit 人抗类风湿关节炎核抗原Multi-class antibodies规格: 48T
Anti-P21/CDKN1A p21蛋白抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh Hyaluronidase2 透明质酸酶2/玻璃酸酶2抗体 规格 0.2ml
NSE ELISA Kit 大鼠神经特异性烯醇化酶 96T
PI3 Kinase p110 beta 英文名称: 磷脂酰肌醇激酶(PI3Kβ)抗体 0.1ml
小鼠胚胎成纤维细胞;STO价格EPOR Kit Human 人 EPOR ELISA配对抗体 ELISA
TTC21B 英文名称: 四聚体多肽蛋白21B抗体 0.2ml
CD24 英文名称: CD24抗体 0.1ml
Anti-CD25/IL-2RA 白介素2受体a链抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml
兔淋巴细胞功能相关抗原3(LFA-3/CD58)ELISA试剂盒英文名称:Rabbit lymphocyte function associated antigen 3,LFA-3 ELISA Kit 进口/原装
兔内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISA试剂盒 英文名称:Rabbit Endothelial nitric oxide synthase,eNOS ELISA Kit 进口/原装
兔尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)ELISA试剂盒英文名称:Rabbit urokinase plasminogen activator,uPA ELISA Kit 特价供应
小鼠胚胎成纤维细胞;STO价格运输保存:采用干冰保存运输。收到细胞时,若干冰已经完全融化,请立即将细胞复苏培养;若尚留有干冰,请立即将细胞放入液氮中保存待用,请按指定条件贮存细胞,切不可将细胞置于高温环境。